乳酸脱氢酶测定试剂(盒)检测

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检测范围

乳酸脱氢酶（LDH）测定试剂（盒）适用于多种生物样本的检测，包括人血清、血浆、脑脊液、胸腔积液及其他体液。该试剂盒主要用于临床医学领域，辅助诊断与监测疾病（如心肌梗死、肝炎、溶血性贫血、恶性肿瘤等），也可用于科研实验或药物研发中细胞活性评估及毒性分析。需注意：样本应避免溶血（红细胞内LDH浓度高），血浆推荐使用肝素或EDTA抗凝剂，避免使用枸橼酸盐或氟化钠。

检测项目

本试剂盒通过定量检测样本中乳酸脱氢酶的总活性（U/L）来评估组织或细胞损伤程度。部分试剂盒可扩展检测LDH同工酶（如LDH1-LDH5），需结合电泳法或免疫抑制法进行分型分析，以定位病变器官（如LDH1升高提示心肌损伤，LDH5升高与肝脏疾病相关）。

检测仪器

1. 分光光度计：适用于手动或半自动检测，需具备340nm波长吸光度监测功能及恒温控制（通常37℃）。
2. 全自动生化分析仪：支持高通量检测，参数需设置为动力学法，波长340nm（主）/660nm（副），温度37℃，部分机型需调整样本与试剂体积比（如1:10）。

检测方法

1. 原理：基于乳酸脱氢酶催化乳酸转化为丙酮酸的反应体系，同时氧化型辅酶Ⅰ（NAD⁺）被还原为NADH，通过监测340nm处吸光度上升速率（ΔA/min）计算酶活性。
2. 步骤：
   • 试剂配制：按说明书复溶冻干试剂，平衡至室温。
   • 样本处理：血清/血浆需离心（3000rpm，10分钟），避免脂血或浑浊样本。
   • 反应体系：将样本与试剂按比例（如10μL样本+1mL试剂）混匀，立即放入37℃恒温比色皿。
   • 数据采集：延迟时间30秒后，连续监测60-180秒的吸光度变化，计算线性反应阶段的ΔA/min。
   • 计算：酶活性（U/L）=（ΔA/min × 反应体系总体积 × 10⁶）/（摩尔消光系数 × 光径 × 样本体积）。公式中，NADH的摩尔消光系数为6.22×10³ L·mol⁻¹·cm⁻¹。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。