细胞毒素检测

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检测范围

细胞毒素检测广泛应用于药物研发、化妆品安全评价、医疗器械生物相容性测试及环境毒理学研究。其检测对象包括：

1. 药物候选化合物：评估药物对正常细胞的毒性作用，筛选安全有效的候选分子。
2. 化妆品原料及成品：检测成分对皮肤细胞的刺激性或细胞毒性。
3. 医疗器械浸提液：分析医疗器械释放物质对细胞的潜在毒性。
4. 生物材料及纳米颗粒：研究材料降解产物或纳米颗粒的细胞相容性。
5. 环境污染物：评估工业废水、重金属等环境因子对细胞的毒性效应。

检测项目

细胞毒素检测涵盖以下关键指标：

1. 细胞存活率：通过代谢活性或膜完整性反映细胞存活状态。
2. 细胞膜完整性：检测细胞膜通透性变化，评估急性毒性损伤。
3. 细胞代谢活性：量化线粒体功能或酶活性，表征细胞健康状态。
4. 凋亡与坏死：区分程序性死亡与坏死性损伤的细胞比例。
5. 炎症因子释放：检测IL-6、TNF-α等炎症相关因子水平。
6. 基因表达变化：分析毒性相关基因（如Caspase-3、Bax/Bcl-2）的表达差异。

检测仪器

1. 酶标仪（微孔板读数仪）：用于比色法（如MTT、CCK-8）和荧光法检测吸光度或荧光强度。
2. 流式细胞仪：通过荧光标记定量分析细胞凋亡、坏死及膜通透性。
3. 倒置荧光显微镜：观察细胞形态变化及荧光染色结果（如Calcein-AM/PI双染）。
4. 实时细胞分析仪（RTCA）：动态监测细胞增殖和毒性反应的阻抗变化。
5. 乳酸脱氢酶（LDH）检测仪：定量细胞裂解释放的LDH酶活性。
6. 高通量测序仪：用于毒性相关基因表达谱或全基因组关联分析。

检测方法

1. MTT比色法：利用四唑盐MTT被活细胞线粒体酶还原为紫色甲瓒，通过吸光度（490 nm）定量细胞活力。
2. LDH释放法：检测细胞膜破损后释放的LDH酶催化乳酸生成丙酮酸，结合INT显色反应（450 nm吸光度）评估毒性。
3. 流式细胞术：采用Annexin V-FITC/PI双染区分凋亡与坏死细胞，或通过FDA/PI染色分析膜完整性。
4. 荧光染色法：
   • Hoechst 33342/PI双染：区分活细胞（蓝色核）、凋亡细胞（核浓缩）及坏死细胞（红色核）。
   • Calcein-AM/EthD-1染色：活细胞显示绿色荧光，死细胞显示红色荧光。
5. ELISA法：定量细胞培养上清中炎症因子（如IL-1β、IL-8）或凋亡标志物（如Cyt-C）。
6. 实时定量PCR（qRT-PCR）：检测毒性相关基因（如p53、Caspase家族）的mRNA表达水平。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。