微核细胞检测

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检测范围

微核细胞检测主要用于评估环境污染物、辐射、化学物质、药物及遗传毒性物质对生物体遗传物质的损伤。其检测范围涵盖以下领域：

1. 环境监测：检测空气、水体及土壤中污染物（如重金属、农药残留）的遗传毒性效应。
2. 职业暴露评估：评估接触工业化学品、放射性物质或制药原料等职业人群的DNA损伤风险。
3. 药物安全测试：在药物研发中筛选具有潜在遗传毒性的候选化合物。
4. 辐射生物学研究：分析电离辐射或紫外线等物理因素诱导的染色体异常。

检测项目

微核细胞检测的核心项目包括：

1. 微核率分析：统计外周血淋巴细胞、骨髓细胞或其他体细胞中微核的出现频率，反映染色体断裂或丢失程度。
2. 细胞增殖指数（CPI）：通过计算分裂细胞比例，评估受试物质对细胞周期的影响。
3. 微核类型鉴别：区分微核来源（如染色体碎片或整条染色体），辅助判断损伤机制。
4. 剂量-效应关系研究：分析不同浓度受试物与微核形成率的关联，确定毒性阈值。

检测仪器

1. 荧光显微镜：用于观察经荧光染料（如吖啶橙、DAPI）标记的微核，提高检测灵敏度和准确性。
2. 流式细胞仪：通过高通量自动化分析细胞悬液，快速筛选微核阳性细胞，适用于大规模样本检测。
3. 全自动细胞图像分析系统：结合人工智能算法，自动识别并统计微核，减少人工误差。
4. 分光光度计：测定细胞悬液浓度，确保样本均一性。

检测方法

1. 样本制备：

   • 采集外周血、骨髓或培养细胞，经细胞分离液处理获得单细胞悬液。
   • 细胞培养（如人淋巴细胞）需添加细胞松弛素B以阻断胞质分裂，便于区分双核细胞中的微核。

2. 染色与固定：

   • 采用吉姆萨染色法或荧光染色法（如Hoechst 33258）对细胞核及微核进行特异性标记。
   • 固定步骤使用甲醇-冰醋酸（3:1）混合液，保留细胞形态并去除杂质。

3. 镜检分析：

   • 随机选择至少1000个细胞，在400~1000倍显微镜下计数含微核的细胞数，排除细胞碎片干扰。
   • 双核细胞中仅统计与主核大小、染色一致的微核。

4. 数据统计：

   • 微核率（‰）=（微核细胞数/观察细胞总数）×1000。
   • 使用SPSS或GraphPad软件进行方差分析或卡方检验，验证结果显著性。

5. 质量控制：

   • 设立阴性（溶剂对照）与阳性（环磷酰胺或丝裂霉素C）对照组，确保实验系统敏感性。
   • 双盲法阅片，由两名实验人员独立计数，结果差异率需小于10%。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。