肥胖模型小鼠检测

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检测范围 本研究针对肥胖模型小鼠（高脂饮食诱导）的生理指标、代谢参数、组织病理学变化及行为学特征进行系统性检测，涵盖体重增长、脂肪分布、糖脂代谢、炎症因子水平、肝脏脂肪变性程度及相关基因表达等维度。实验组与对照组各纳入20只C57BL/6J小鼠，实验周期为16周。

检测项目

1. 生理指标
   • 体重动态监测
   • 体脂率（皮下脂肪与内脏脂肪占比）
   • 摄食量与饮水量的日均记录
2. 代谢参数
   • 空腹血糖（FBG）与胰岛素（FINS）水平
   • 口服葡萄糖耐量试验（OGTT）与胰岛素耐量试验（ITT）
   • 血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）及高密度脂蛋白（HDL-C）含量
3. 组织病理学分析
   • 肝脏组织HE染色评估脂肪变性及炎性浸润
   • 白色脂肪组织油红O染色定量脂滴面积
   • 脂肪细胞直径测量（ImageJ软件分析）
4. 分子生物学指标
   • 实时荧光定量PCR（qPCR）检测脂代谢相关基因（如PPAR-γ、FASN、ACC1）表达
   • 酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清炎症因子（TNF-α、IL-6、Leptin）浓度

检测仪器

1. 电子天平（精确至0.01g，用于体重及摄食量测定）
2. 双能X射线吸收仪（DEXA，Lunar PIXImus II，体脂率分析）
3. 全自动生化分析仪（Hitachi 7080，检测血清脂质及血糖水平）
4. 血糖仪（Accu-Chek Performa，OGTT/ITT动态监测）
5. 显微成像系统（Nikon Eclipse E100，组织切片观察与图像采集）
6. 实时荧光定量PCR仪（Bio-Rad CFX96，基因表达分析）
7. 酶标仪（Thermo Scientific Multiskan GO，ELISA检测）

检测方法

1. 体重与代谢参数测定

   • 每周固定时间称量小鼠体重，连续记录16周。
   • OGTT：禁食12小时后灌胃2g/kg葡萄糖，尾静脉采血测0、30、60、120分钟血糖值。
   • 血清分离：眼眶取血后离心（3000rpm，10min）获取血清，-80℃保存待测。

2. 组织样本处理

   • 肝脏及脂肪组织取材后，4%多聚甲醛固定48小时，石蜡包埋切片（厚度4μm）。
   • HE染色：苏木精-伊红染色法观察脂肪空泡及炎性细胞浸润。
   • 油红O染色：冰冻切片（厚度8μm）染色后，显微镜下定量脂滴面积占比。

3. 分子生物学检测

   • RNA提取：TRIzol法提取肝脏组织总RNA，逆转录为cDNA。
   • qPCR反应：SYBR Green法，以β-actin为内参，2^(-ΔΔCt)法计算基因相对表达量。
   • ELISA检测：按试剂盒（R&D Systems）标准流程操作，450nm波长读取吸光度值。

4. 数据分析

   • 数据以均值±标准差表示，组间差异采用t检验或单因素方差分析（GraphPad Prism 9.0），P<0.05为显著性阈值。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。