感染小鼠模型检测

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检测范围

本研究基于BALB/c和C57BL/6品系小鼠建立的细菌（如金黄色葡萄球菌）、病毒（如流感病毒H1N1）及真菌（如白色念珠菌）感染模型。实验周期覆盖感染后0小时至14天，检测样本包括血液、脾脏、肝脏、肺组织及脑脊液。实验组与对照组各包含20只小鼠，雌雄各半，体重范围为18-22 g，饲养于SPF级环境。

检测项目

1. 病原体载量检测
   • 细菌定量：菌落形成单位（CFU/g组织）
   • 病毒滴度：半数组织培养感染剂量（TCID50/mL）
   • 真菌负荷：实时荧光定量PCR（qPCR）检测基因组拷贝数
2. 免疫指标分析
   • 血清细胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-γ）浓度
   • 脾脏淋巴细胞亚群比例（CD4+/CD8+ T细胞、NK细胞）
   • 特异性抗体效价（IgG/IgM）
3. 生理病理参数
   • 体温变化（红外测温仪监测）
   • 体重下降率（日称量记录）
   • 组织病理学评分（HE染色观察炎性浸润及坏死程度）
4. 生存率与行为学评估
   • 感染后生存曲线（Kaplan-Meier分析）
   • 活动力评分（转棒实验、旷场实验）

检测仪器

1. 病原体检测
   • 实时荧光定量PCR仪（ABI 7500 Fast）
   • 全自动酶标仪（BioTek Synergy H1，用于ELISA检测）
   • 微生物培养箱（Thermo Scientific Heratherm）
2. 免疫分析
   • 流式细胞仪（BD FACSCanto II）
   • 多功能液相芯片分析系统（Luminex 200）
3. 生理监测
   • 高精度电子天平（METTLER TOLEDO ME204E）
   • 红外热成像仪（FLIR T540）
4. 组织学与成像
   • 全自动切片机（Leica RM2235）
   • 数字显微成像系统（Nikon Eclipse Ci-L）

检测方法

1. 病原体定量
   • qPCR：采用SYBR Green法，引物针对病原体特异性基因（如细菌16S rRNA、病毒NP基因），反应条件为95℃预变性10分钟，随后40个循环（95℃ 15秒，60℃ 1分钟）。
   • 菌落计数：组织匀浆液梯度稀释后接种于LB琼脂平板，37℃培养24小时统计CFU。
2. 细胞因子检测
   • ELISA：血清样本按1:4稀释，加入预包被抗体板，37℃孵育1小时，TMB显色后450 nm波长测定吸光度。
3. 流式细胞术
   • 脾脏单细胞悬液经CD3-FITC、CD4-PE、CD8-APC抗体标记，避光孵育30分钟后上机分析。
4. 组织病理学
   • 肺/肝组织固定于4%多聚甲醛，石蜡包埋后切片（4 μm厚度），HE染色后由双盲病理学评分系统评估病变程度（0-4分：无损伤至广泛坏死）。
5. 行为学测试
   • 转棒实验：小鼠置于转速20 rpm的旋转棒上，记录跌落潜伏期（秒）；旷场实验：记录5分钟内中心区域活动时间占比。

（注：所有实验均符合AAALAC及机构动物伦理审查标准，数据以均值±标准差表示，统计学分析采用GraphPad Prism 9.0软件。）

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。