病毒灭活检测

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检测范围

病毒灭活检测主要针对生物制品、医疗器械、药品生产中的病毒污染风险，确保产品符合生物安全性要求。检测对象包括但不限于血液制品、疫苗、细胞治疗产品、基因治疗载体以及医疗灭菌器械。涵盖的病毒类型包括包膜病毒（如疱疹病毒、流感病毒）、非包膜病毒（如腺病毒、诺如病毒）以及高抗性病毒（如细小病毒）。检测范围同时涉及不同灭活工艺（化学法、物理法、辐照法）的验证，适用于研发、生产及质量控制环节。

检测项目

1. 病毒灭活效果验证：通过定量检测灭活前后病毒滴度的变化，评估灭活效率（如降低≥4 log为有效）。
2. 残留病毒检测：针对灭活后样品中可能存活的病毒进行核酸或抗原检测。
3. 灭活动力学分析：监测灭活过程中病毒滴度随时间的变化趋势，确定灭活速率常数。
4. 交叉污染风险评价：验证灭活工艺对多种病毒的同时灭活能力。
5. 灭活稳定性测试：评估灭活后样品在储存条件下的病毒再激活风险。

检测仪器

1. 实时荧光定量PCR仪（如Applied Biosystems 7500）：用于病毒核酸定量检测。
2. 细胞培养与病毒扩增系统（如CO₂培养箱、生物安全柜）：支持病毒增殖及感染性检测。
3. 病毒滴度测定设备：包括空斑形成单位（PFU）分析仪和50%组织培养感染剂量（TCID50）计算软件。
4. 电子显微镜（如透射电镜）：观察病毒形态变化以辅助灭活效果判定。
5. 酶标仪与流式细胞仪：用于免疫学检测（如ELISA）和细胞表面抗原分析。

检测方法

1. 病毒滴度测定法

   • 空斑法：将灭活后样品接种敏感细胞单层，通过计数空斑形成单位（PFU）计算病毒残留量。
   • TCID50法：通过系列稀释法确定半数感染剂量，结合Reed-Muench公式计算病毒滴度。

2. 核酸残留检测

   • 采用实时荧光定量PCR（qPCR）或数字PCR（dPCR）技术，设计病毒特异性引物与探针，定量检测灭活后病毒基因组残留量。

3. 免疫学检测

   • 通过ELISA、Western Blot或流式细胞术检测病毒抗原或表面蛋白的破坏情况，验证灭活完整性。

4. 感染性验证实验

   • 将灭活样品接种至易感动物模型（如小鼠、豚鼠）或离体器官培养系统，观察病理反应或病毒复制迹象。

5. 灭活工艺验证

   • 依据ISO 22442、WHO指南或《中国药典》要求，设计多批次重复实验，结合统计学分析（如Student&39;s t-test）确认灭活工艺的稳定性和重现性。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。