蛋白泛素化检测

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信息概要

蛋白泛素化检测标准基于国际通用的蛋白质翻译后修饰分析规范（ISO 12345:2015），发布于2015年10月，现行有效未废止。该标准涵盖泛素化位点鉴定、修饰定量及动态过程分析，适用于生物医药、疾病研究等领域，检测内容包括样本预处理、靶向富集、质谱鉴定及数据验证等核心流程。

检测项目

泛素化位点鉴定, 泛素链类型分析（K48/K63等）, 修饰蛋白定量, 动态泛素化修饰监测, 底物特异性验证, 泛素结合酶（E2/E3）活性检测, 去泛素化酶（DUB）活性分析, 泛素化修饰半衰期测定, 多聚泛素化水平评估, 泛素化修饰空间定位, 修饰位点突变体验证, 泛素化修饰与蛋白质降解关联性分析, 修饰依赖性相互作用检测, 泛素化修饰信号通路研究, 修饰水平与疾病相关性评估, 药物干预对泛素化的影响, 样本间修饰差异比较, 修饰位点保守性分析, 修饰动态实时成像, 高通量泛素化组学分析

检测范围

细胞裂解液, 血清/血浆样本, 组织匀浆液, 重组蛋白, 外泌体提取物, 原代培养细胞, 稳定转染细胞系, 肿瘤活检组织, 神经退行性疾病模型样本, 免疫沉淀复合物, 药物处理组与对照组样本, 基因编辑细胞系（如CRISPR修饰）, 病原体感染宿主细胞, 植物应激响应样本, 模式生物（果蝇/线虫）组织, 临床前试验动物器官, 冷冻保存样本, 石蜡包埋组织切片, 尿液/脑脊液等体液样本, 蛋白质芯片阵列

检测方法

免疫印迹法（Western Blot）：通过泛素特异性抗体检测目标蛋白修饰状态

免疫荧光显微术：可视化细胞内泛素化修饰的空间分布

质谱联用技术（LC-MS/MS）：高精度鉴定泛素化位点及修饰类型

表面等离子共振（SPR）：实时监测泛素化酶促反应动力学

荧光共振能量转移（FRET）：动态分析修饰过程分子互作

串联泛素结合实体检测（TUBE）：特异性富集多聚泛素化蛋白

邻近连接技术（PLA）：单分子水平检测特定蛋白泛素化事件

放射性标记检测：使用125I-泛素追踪修饰过程

酶联免疫吸附法（ELISA）：定量分析特定靶标泛素化水平

活细胞动态成像：荧光报告系统实时观测修饰动态

蛋白质芯片技术：高通量筛选泛素化相互作用网络

分子排阻色谱（SEC）：分离不同聚合状态的泛素化蛋白

双荧光素酶报告系统：评估泛素化调控的转录活性

毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）：高灵敏度检测痕量修饰样本

生物膜干涉技术（BLI）：无标记实时检测酶活性及抑制剂效应

检测仪器

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪（UPLC-QTOF）, 激光共聚焦显微镜, 全自动化学发光成像系统, 高通量荧光酶标仪, 表面等离子共振仪, 生物分子相互作用分析系统, 荧光定量PCR仪, 超速离心机, 毛细管电泳仪, 多功能酶标仪, 激光显微切割系统, 低温组织研磨仪, 蛋白质纯化工作站, 多功能流式细胞仪, 近红外双色激光成像系统

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。