致突变试验检测

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检测范围

致突变试验的检测范围涵盖多种可能诱发基因突变或染色体损伤的物质，包括但不限于：

1. 化学品：工业原料、农药、药品、食品添加剂等合成或天然化合物；
2. 环境样本：空气颗粒物、水体污染物、土壤提取物等；
3. 生物制剂：病毒、细菌代谢产物、生物毒素等；
4. 新型材料：纳米材料、高分子聚合物等。 此外，试验对象包括原核生物（如细菌）、真核生物（如哺乳动物细胞）及整体动物模型（如小鼠）。

检测项目

致突变试验的核心检测项目包括：

1. 细菌回复突变试验（Ames试验）：通过检测组氨酸缺陷型菌株的回复突变率，评估物质的致突变性。
2. 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：观察受试物对细胞染色体结构（断裂、缺失、易位等）的影响。
3. 微核试验：检测细胞分裂后期残留的染色体断片或整条染色体形成的微核，适用于体外细胞或体内动物模型。
4. 彗星试验（单细胞凝胶电泳）：通过DNA断裂程度评估遗传物质损伤。
5. 基因突变分析（如HPRT试验）：检测哺乳动物细胞特定基因座的突变频率。

检测仪器

1. 细菌培养与计数系统：
   • 全自动菌落计数仪（用于Ames试验的菌落分析）；
   • 酶标仪（检测显色反应或荧光信号）。
2. 细胞与遗传分析设备：
   • 流式细胞仪（微核试验中区分含微核的细胞）；
   • 荧光显微镜（染色体畸变和彗星试验的成像）；
   • 凝胶电泳系统（彗星试验的DNA迁移分析）。
3. 分子生物学仪器：
   • PCR仪（基因突变位点扩增）；
   • 高通量测序仪（突变谱的深度解析）。

检测方法

1. Ames试验流程：

   • 步骤1：选择特定菌株（如TA98、TA100），制备含受试物的顶层琼脂；
   • 步骤2：将菌液与受试物混合后铺板，37℃培养48小时；
   • 步骤3：统计回复突变菌落数，与阴性/阳性对照组比较。

2. 微核试验操作：

   • 体外法：将哺乳动物细胞（如CHL或L5178Y）暴露于受试物，经细胞松弛素B阻断胞质分裂后，吉姆萨染色观察微核；
   • 体内法：对实验动物（如小鼠）给药，采集骨髓或外周血淋巴细胞进行微核计数。

3. 染色体畸变试验步骤：

   • 细胞暴露于受试物后，加入秋水仙素阻断有丝分裂；
   • 低渗处理、固定、吉姆萨染色，显微镜下分析中期细胞的染色体异常。

4. 彗星试验方法：

   • 将单细胞悬液与琼脂糖混合并固化于载玻片；
   • 裂解细胞后碱性条件下电泳，荧光染料（如SYBR Green）染色；
   • 通过彗星尾长和荧光强度量化DNA损伤程度。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。