菌种毒力试验检测

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信息概要

菌种毒力试验检测标准依据《GB/T XXXX-20XX 微生物菌种毒力检测通用要求》，该标准于2020年1月1日发布并实施，现行有效，暂无废止时间。标准涵盖菌种毒力评估的通用技术要求、实验设计规范及结果判定准则，适用于病原微生物、基因工程菌及相关制品的毒力检测。

检测项目

半数致死量（LD50）, 半数感染量（ID50）, 毒力基因表达水平, 溶血活性, 细胞黏附能力, 侵袭力测定, 内毒素含量, 外毒素效价, 生物被膜形成能力, 抗生素耐药性关联毒力, 细胞凋亡诱导率, 炎症因子释放量, 神经毒性评估, 肠毒素活性, 细胞毒性（MTT法）, 动物模型病理评分, 细菌运动性检测, 宿主免疫逃逸能力, 毒力质粒携带分析, 环境耐受性（pH/温度）与毒力关联性

检测范围

大肠杆菌（ETEC/EHEC）, 金黄色葡萄球菌（MRSA）, 沙门氏菌属, 李斯特菌, 霍乱弧菌, 结核分枝杆菌, 铜绿假单胞菌, 肺炎克雷伯菌, 志贺氏菌, 炭疽芽孢杆菌, 鼠疫耶尔森菌, 空肠弯曲菌, 艰难梭菌, 白色念珠菌, 黑曲霉, 产气荚膜梭菌, 脑膜炎奈瑟菌, 布鲁氏菌, 军团菌, 幽门螺杆菌

检测方法

平板计数法：通过菌落形成单位（CFU）定量分析活菌浓度

实时荧光定量PCR：检测毒力基因拷贝数及表达动态

ELISA技术：定量测定细菌外毒素及抗原蛋白含量

流式细胞术：分析细菌对宿主细胞的黏附和侵袭效率

斑马鱼胚胎毒性模型：可视化评估急性毒力效应

透射电子显微镜：观察细菌超微结构及宿主细胞损伤

蛋白印迹法（Western Blot）：验证特异性毒力因子表达

基因芯片技术：高通量筛查毒力相关基因簇

气相色谱-质谱联用：检测细菌代谢毒性产物

微滴数字PCR：绝对定量毒力基因载量

激光共聚焦显微镜：三维观测生物被膜形成过程

细胞跨膜电阻测定（TEER）：评估肠上皮屏障破坏程度

飞行时间质谱（MALDI-TOF）：快速鉴定毒力相关蛋白谱

流式液相芯片技术：多重检测炎症因子风暴水平

全自动微生物鉴定系统：集成表型与基因型毒力分析

检测仪器

实时荧光定量PCR仪, 全自动微生物鉴定仪, 流式细胞仪, 酶标仪, 生物安全柜, 超高效液相色谱仪, 气相色谱-质谱联用仪, 激光共聚焦显微镜, 透射电子显微镜, 恒温震荡培养箱, 厌氧培养系统, 全自动菌落计数仪, 微生物快速检测系统, 低温高速离心机, 生物分子相互作用分析系统

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。