菌种毒力检测

(CMA)     (ISO) (高新技术企业)

菌种毒力检测范围 菌种毒力检测主要针对具有潜在致病性的微生物，包括但不限于以下范围：

1. 医学病原菌：如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌（致病性血清型）、肺炎克雷伯菌、结核分枝杆菌等；
2. 食源性致病菌：如沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌等；
3. 植物病原菌：如青枯菌、稻瘟病菌等；
4. 真菌及病毒：如白色念珠菌、曲霉菌、流感病毒（毒力相关基因检测）等。

菌种毒力检测项目 检测涵盖以下毒力相关指标：

1. 毒素检测：包括内毒素（如脂多糖）、外毒素（如霍乱毒素、肠毒素）的定性与定量分析；
2. 粘附与侵袭能力：评估菌体对宿主细胞的粘附效率及侵入能力；
3. 毒力基因表达：通过基因检测确定毒力相关基因（如溶血素基因、侵袭素基因）的存在与表达水平；
4. 生物膜形成能力：检测菌株在特定条件下形成生物膜的能力；
5. 耐药性分析：评估菌株对抗菌药物的敏感性及其耐药基因携带情况；
6. 动物模型验证：通过感染实验动物（如小鼠）评估菌株的致病性等级。

菌种毒力检测仪器

1. PCR仪及实时荧光定量PCR系统：用于毒力基因的扩增与表达量分析；
2. 酶联免疫吸附检测仪（ELISA）：检测毒素蛋白及宿主免疫反应标志物；
3. 流式细胞仪：分析细菌粘附宿主细胞的比例及细胞凋亡情况；
4. 激光共聚焦显微镜：观察生物膜三维结构及菌体分布；
5. 自动化药敏分析系统（如VITEK 2）：测定抗菌药物最小抑菌浓度（MIC）；
6. 质谱仪（MALDI-TOF）：快速鉴定菌种及毒力相关代谢产物。

菌种毒力检测方法

1. 分子生物学方法

   • PCR扩增：设计特异性引物扩增毒力基因（如大肠杆菌的stx1/stx2基因）；
   • 基因测序：验证毒力基因序列的正确性及突变位点；
   • RT-qPCR：定量分析毒力基因的转录水平。

2. 细胞实验

   • 粘附实验：将菌株与宿主细胞共培养，通过离心洗涤后计数残留细菌；
   • 侵袭实验：利用庆大霉素保护法区分胞内与胞外菌，计算侵袭率；
   • 细胞毒性检测：通过LDH释放法或MTT法评估毒素对宿主细胞的杀伤作用。

3. 免疫学检测

   • ELISA：定量检测细菌分泌毒素（如金黄色葡萄球菌的肠毒素SEB）；
   • Western Blot：验证毒力蛋白的表达情况。

4. 表型分析

   • 结晶紫染色法：定量生物膜形成能力；
   • 药敏试验：采用CLSI标准方法测定菌株对抗菌药物的敏感性；
   • 溶血试验：观察菌株在血琼脂平板上的溶血环特征。

5. 动物实验

   • 半数致死量（LD50）测定：通过梯度剂量感染实验动物，评估菌株毒力强度；
   • 组织病理学分析：取感染动物脏器进行切片染色，观察病理损伤程度。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。