信息概要
本标准针对细胞实验检测的技术规范，发布于2015年8月，现行有效版本为GB/T 30736-2020，未明确废止时间。检测内容包括细胞活性、增殖、毒性、凋亡、代谢功能等核心指标，覆盖体外培养细胞的理化特性及生物学行为分析，符合国际ISO 10993-5:2009生物相容性评价相关要求。
检测项目
细胞增殖率,细胞凋亡率,细胞周期分布,细胞迁移能力,细胞侵袭能力,细胞黏附力,细胞毒性,细胞存活率,细胞膜完整性,线粒体膜电位,细胞内活性氧水平,ATP含量,乳酸脱氢酶释放量,细胞凋亡相关蛋白表达,细胞因子分泌水平,基因表达水平,细胞信号通路活性,细胞代谢活性,细胞形态学观察,细胞集落形成能力
检测范围
人源肿瘤细胞系,动物源正常细胞系,干细胞,原代细胞,免疫细胞,神经细胞,上皮细胞,内皮细胞,成纤维细胞,肝细胞,肾细胞,心肌细胞,肺细胞,骨细胞,血液细胞,肿瘤原代细胞,胚胎细胞,转基因细胞,永生化细胞系,3D培养细胞模型
检测方法
CCK-8法：通过水溶性四唑盐检测细胞增殖活性
Annexin V/PI双染法：流式细胞术定量分析细胞凋亡率
Transwell实验：利用微孔滤膜评估细胞迁移侵袭能力
MTT比色法：线粒体脱氢酶活性间接反映细胞存活状态
Calcein-AM/PI染色：荧光双标法定性检测细胞膜完整性
JC-1探针法：通过荧光偏振变化检测线粒体膜电位
DCFH-DA荧光探针：定量细胞内活性氧自由基水平
ATP生物发光法：基于萤光素酶体系检测ATP浓度
LDH释放试验：比色法测定细胞膜损伤程度
Western Blot：检测特定凋亡相关蛋白表达量
ELISA：定量细胞培养上清中细胞因子分泌水平
qRT-PCR：分析特定基因mRNA表达差异
细胞划痕实验：动态观察细胞迁移修复能力
流式细胞周期分析：碘化丙啶染色检测DNA含量分布
活细胞动态监测：采用xCELLigence系统实时追踪细胞行为
检测仪器
流式细胞仪,酶标仪,荧光显微镜,低温离心机,实时荧光定量PCR仪,细胞培养箱,超净工作台,倒置相差显微镜,多功能微孔板检测仪,激光共聚焦显微镜,显微成像系统,生物安全柜,电转染仪,细胞计数仪,超微量分光光度计
