信息概要
数字荧光原位杂交（Digital Fluorescence In Situ Hybridization，D-FISH）检测是一种基于荧光标记的核酸探针与目标DNA/RNA序列特异性结合的高分辨率分子检测技术，主要用于染色体异常、基因扩增及微生物鉴定等领域。该检测标准参考国际ISO 15189:2012《医学实验室质量和能力要求》及相关行业指南，发布于2015年，现行版本为2020年修订版，目前未明确废止时间。检测涵盖样本制备、探针杂交、信号分析及结果解读全流程，确保高灵敏度和特异性。
检测项目
基因扩增检测,染色体易位检测,微缺失/微重复分析,HER2/neu状态评估,ALK重排检测,ROS1融合基因检测,EGFR突变分析,BCR-ABL融合基因定量,NTRK基因融合检测,PD-L1表达水平分析,肿瘤异质性评估,端粒长度测定,微生物种属鉴定,病毒载量定量,循环肿瘤细胞（CTC）计数,胎儿染色体非整倍体筛查,骨髓增生异常综合征（MDS）相关异常,淋巴瘤分型标志物检测,生殖细胞遗传变异分析,药物耐药基因筛查
检测范围
乳腺癌组织样本,非小细胞肺癌细胞样本,血液游离DNA,实体瘤穿刺样本,骨髓涂片,宫颈脱落细胞,脑脊液样本,淋巴组织切片,循环肿瘤细胞（CTC）富集样本,胎儿绒毛膜样本,泌尿系统脱落细胞,消化系统内镜活检组织,皮肤病变组织,骨肉瘤冷冻切片,甲状腺细针穿刺样本,前列腺穿刺标本,卵巢癌腹水样本,神经母细胞瘤组织,胎盘组织,外周血淋巴细胞
检测方法
荧光显微镜成像技术：通过高倍物镜捕获探针与目标DNA结合的荧光信号。
多色FISH探针杂交：使用不同荧光标记的探针实现多靶标同步检测。
自动化图像分析系统：基于AI算法定量荧光信号强度与空间分布。
染色体核型扫描：结合DAPI反染技术定位杂交信号至特定染色体区域。
单细胞FISH检测：针对微量或稀有样本进行单细胞水平分析。
多重探针共定位分析：验证基因融合事件的空间共定位关系。
信号放大技术：采用酪胺信号放大（TSA）增强弱表达靶标检出率。
熔解曲线分析：优化杂交条件以区分特异性与非特异性结合。
数字化信号定量：通过软件模块将荧光信号转换为拷贝数数值。
阴性/阳性对照内参法：设置内源性参照基因确保检测体系稳定性。
组织微阵列（TMA）高通量检测：批量处理多样本提升检测效率。
低温保存样本复检：针对冻存样本优化探针穿透性与信号保留。
荧光淬灭校正：使用标准品校正仪器通道间的信号干扰。
三维成像重建：适用于厚组织切片的立体信号解析。
流式FISH联用技术：整合流式细胞分选与FISH实现稀有细胞靶向分析。
检测仪器
全自动荧光显微镜,数字切片扫描仪,多光谱成像系统,高通量玻片加载器,恒温杂交仪,离心机,真空脱蜡炉,组织切片机,荧光定量PCR仪,显微操作平台,超低温冰箱,生物安全柜,自动盖片机,激光共聚焦显微镜,流式细胞分选仪
