fish实验检测

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检测范围 荧光原位杂交（Fluorescence In Situ Hybridization, FISH）技术主要用于检测DNA或RNA序列在细胞或组织中的定位、拷贝数变化及特定基因异常。其检测范围涵盖：

1. 遗传性疾病：如染色体非整倍体（唐氏综合征）、微缺失综合征（如22q11缺失）。
2. 肿瘤诊断与分型：包括实体瘤（乳腺癌HER2扩增、肺癌ALK重排）和血液系统肿瘤（慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因）。
3. 病原微生物鉴定：快速检测特定病原体（如细菌、病毒）的核酸序列。
4. 生殖医学：胚胎植入前遗传学筛查（PGT）及精子/卵子染色体分析。

检测项目 FISH检测的核心项目包括：

1. 基因扩增：如HER2/neu基因在乳腺癌中的扩增分析。
2. 染色体易位：如血液肿瘤中的BCR-ABL、PML-RARA融合基因检测。
3. 微缺失/微重复：如针对染色体区域17p13（Miller-Dieker综合征）的特异性探针检测。
4. 染色体数目异常：如性染色体（X/Y）非整倍体及常染色体（13、18、21号）数目分析。
5. 病原体核酸定位：如EB病毒（EBER）在鼻咽癌组织中的原位检测。

检测仪器 FISH实验需依赖以下核心仪器设备：

1. 荧光显微镜：配备特定激发/发射滤光片（如DAPI、FITC、Cy3、Texas Red），用于观察荧光信号。
2. 杂交仪：控温精准的杂交炉或原位PCR仪，用于探针与靶序列的变性及杂交。
3. 图像分析系统：如MetaSystems或BioView全自动扫描平台，用于荧光信号定量及结果判读。
4. 样本处理设备：包括组织切片机、细胞离心机及脱水仪，用于样本制备。

检测方法 FISH实验遵循标准化操作流程：

1. 样本制备：
   • 组织样本：石蜡切片经脱蜡、蛋白酶消化暴露DNA。
   • 细胞样本：外周血或培养细胞经低渗处理、固定后滴片。
2. 探针杂交：
   • 将标记荧光染料的DNA探针（如双色断裂探针、位点特异性探针）与靶DNA共变性（73°C, 5分钟），随后37°C杂交4-16小时。
3. 洗脱与复染：
   • 严格洗脱未结合探针（2×SSC/0.3% NP-40，73°C），DAPI复染细胞核。
4. 信号判读：
   • 荧光显微镜下计数至少200个细胞，分析荧光信号数目、位置及强度。
   • 异常判定标准：如HER2扩增（信号比≥2.0）或BCR-ABL融合（双色信号重叠）。
5. 质量控制：
   • 每批次实验设置阳性和阴性对照，排除探针降解或杂交效率不足导致的假阴性/阳性。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。