自噬流式检测

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信息概要

自噬流式检测标准基于细胞自噬过程的分子标记物定量分析，发布于2018年7月，现行版本为2022年修订版（GB/T 40123-2022），暂无废止计划。该标准涵盖自噬相关蛋白、溶酶体活性及细胞器动态变化的检测要求，适用于药物研发、肿瘤生物学及神经退行性疾病研究领域。

检测项目

LC3-II/LC3-I比值, p62蛋白表达量, ATG5-ATG12复合物水平, Beclin-1表达强度, 溶酶体膜通透性, 自噬小体数量, 线粒体自噬标记物（如PINK1/Parkin）, 自噬相关基因（如ULK1、mTOR）活性, 溶酶体pH值, 自噬流速率, 细胞活力（与自噬关联性）, 自噬抑制剂/诱导剂效应验证, 自噬相关mRNA表达量, 泛素化蛋白聚集程度, 内质网自噬标志物（如FAM134B）, 脂噬相关蛋白（如PLIN2）, 线粒体膜电位变化, 活性氧（ROS）水平, 细胞凋亡与自噬交叉调控分析, 自噬-溶酶体融合效率

检测范围

肿瘤细胞系（如HeLa、A549）, 原代免疫细胞, 神经干细胞, 药物诱导自噬模型, 基因编辑自噬缺陷模型, 自噬荧光报告细胞株, 线粒体自噬特异性探针, 溶酶体功能检测试剂盒, 自噬抑制剂（如氯喹、3-MA）, 自噬诱导剂（如雷帕霉素）, 纳米材料自噬毒性样品, 病毒侵染自噬调控样本, 神经退行性疾病模型（如阿尔茨海默病）, 心血管疾病相关细胞模型, 肝脏自噬代谢样本, 肌肉萎缩症研究样本, 肠道上皮细胞自噬模型, 植物细胞自噬样本, 微生物与宿主互作自噬样本, 外泌体与自噬关联样本

检测方法

荧光标记抗体法（针对LC3-II/p62等蛋白的免疫荧光定量）

mCherry-GFP-LC3双标系统（区分自噬小体与溶酶体融合状态）

流式细胞术检测溶酶体探针（如LysoTracker Red染色强度）

线粒体膜电位JC-1探针法（评估线粒体自噬）

Western Blot验证自噬相关蛋白表达量

qRT-PCR定量自噬基因转录水平

活细胞动态成像（监测自噬小体形成过程）

pH敏感性荧光探针（如pHrodo标记测定溶酶体酸化）

电子显微镜超微结构分析（金标准自噬小体计数）

ATP含量检测（评估自噬能量代谢状态）

细胞透射电镜（TEM）观察自噬结构

基因敲除/过表达模型功能验证

荧光共振能量转移（FRET）检测蛋白相互作用

高内涵筛选（HCS）多参数自噬表型分析

微流控芯片单细胞自噬动力学监测

检测仪器

流式细胞仪, 共聚焦显微镜, 超分辨率显微镜, 酶标仪, 实时荧光定量PCR仪, 蛋白质印迹成像系统, 激光扫描细胞分析仪, 活细胞工作站, 透射电子显微镜, 扫描电镜, 高通量显微成像系统, 微流控芯片检测平台, 荧光偏振分析仪, 细胞能量代谢分析仪, 多功能酶标仪

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。