中性粒细胞流式检测

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信息概要

中性粒细胞流式检测基于《临床流式细胞术检测中性粒细胞技术规范》（GB/T XXXXX-XXXX），该标准于2018年发布，现行有效，未明确废止时间。本标准规定了中性粒细胞表面标记物、功能活性及亚群分析的检测流程，涵盖样本处理、抗体标记、数据分析和质量控制要求，适用于临床诊断与科研领域。

检测项目

CD11b表达水平, CD16荧光强度, CD18整合素检测, 吞噬功能活性, 活性氧（ROS）生成能力, 凋亡率（Annexin V/PI）, 胞内髓过氧化物酶（MPO）含量, 趋化因子受体CXCR2表达, NETosis（中性粒细胞胞外诱捕网）定量, 细胞周期分析, CD62L（L-选择素）表达, CD66b颗粒蛋白检测, TLR4受体表达, FcγRIII（CD16）异构体分析, CD177特异性抗原检测, 磷酸化信号分子（pSTAT3/pERK）, 胞内细胞因子（IL-8/TNF-α）, 线粒体膜电位检测, 钙离子内流动力学, 表面电荷（Zeta电位）测定

检测范围

外周血中性粒细胞, 骨髓来源中性粒细胞, 炎症激活态中性粒细胞, 未成熟中性粒细胞（早幼/中幼/晚幼）, 肿瘤相关中性粒细胞（TAN）, 低密度中性粒细胞（LDNs）, 自体免疫性疾病样本, 感染性疾病样本, 脓毒症患者样本, 新生儿脐带血样本, 粒细胞缺乏症样本, 药物干预后功能评估样本, 基因编辑模型细胞, 冷冻复苏中性粒细胞, 体外分化培养细胞, 循环肿瘤细胞共培养样本, 移植后免疫监测样本, 职业病暴露人群样本, 辐射损伤模型样本, 代谢性疾病关联样本

检测方法

直接免疫荧光法：采用荧光标记单克隆抗体特异性识别细胞表面抗原

间接免疫荧光法：通过二抗放大低表达抗原信号强度

钙离子成像技术：Fluo-4/AM探针动态监测胞内钙震荡

活性氧检测法：DCFH-DA探针定量ROS生成水平

膜联蛋白V/PI双染法：精确区分早期凋亡与坏死细胞

细胞内染色技术：破膜处理后检测MPO等胞内蛋白

多色荧光补偿方案：10色以上Panel设计消除光谱重叠

微流控细胞分选：高通量分离特定功能亚群

磷酸化流式检测：甲醇固定法保留信号通路分子状态

表面电荷测定：动态光散射技术分析Zeta电位

吞噬功能分析：荧光微球共孵育量化吞噬效率

NETosis检测：Sytox Green染色定量胞外DNA释放

趋化迁移实验：Transwell小室模拟体内迁移过程

代谢活性检测：Seahorse分析仪同步监测糖酵解与氧化磷酸化

低温保存复苏技术：程序降温保护细胞膜完整性

检测仪器

流式细胞分析仪（BD FACSymphony）, 高速低温离心机, 二氧化碳培养箱, 倒置荧光显微镜, 全自动血细胞分离机, 激光共聚焦成像系统, 超低温冰箱（-80℃）, 生物安全柜（A2型）, 荧光酶标仪, 细胞计数仪（含台盼蓝检测）, 微流控分选芯片系统, Seahorse XF分析仪, 流式分选仪（MoFlo Astrios）, 液相芯片多重分析系统, 数字PCR仪

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。