类器官药敏检测

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检测范围

类器官药敏检测主要针对肿瘤类器官和疾病模型类器官，涵盖多种癌症类型（如结直肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌等）及部分非肿瘤疾病（如炎症性肠病、肝纤维化等）。检测样本包括患者来源的类器官（PDO）和标准化的商业类器官模型。适用范围涉及药物疗效评估、个体化用药指导、耐药性分析及新药开发筛选，尤其适用于晚期或复发难治性肿瘤患者的精准治疗方案制定。

检测项目

1. 细胞活性检测：通过评估药物处理后的类器官存活率，量化药物对目标类器官的抑制或杀伤效果。
2. 药物代谢分析：检测类器官对药物的吸收、代谢及毒性反应，模拟体内药物动力学特征。
3. 基因表达与信号通路研究：结合转录组或蛋白组学，分析药物干预后关键基因（如EGFR、KRAS、HER2）及通路（如PI3K/AKT、Wnt/β-catenin）的变化。
4. 耐药性测试：评估类器官对化疗药、靶向药或免疫治疗药物的长期耐药性演变。
5. 组合用药筛选：探索多药物联用方案的协同或拮抗效应，优化治疗策略。

检测仪器

1. 高通量自动化筛选系统（如PerkinElmer Opera Phenix）：用于大规模药物库的自动化加样及类器官动态监测。
2. 共聚焦显微成像系统（如Zeiss LSM 980）：实现类器官三维结构的实时观察及荧光标记分析。
3. 流式细胞仪（如BD FACSCelesta）：量化药物处理后类器官的细胞凋亡、周期分布及活性氧水平。
4. 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）：测定类器官内药物及其代谢产物的浓度。
5. 实时荧光定量PCR仪（如Bio-Rad CFX96）：检测药物干预后特定基因的差异表达。

检测方法

1. 类器官培养与标准化：

   • 从患者组织或细胞系中提取干细胞/祖细胞，在基质胶（如Matrigel）中培养形成类器官，培养基含生长因子（EGF、FGF等）。
   • 通过形态学（直径、结构完整性）和标志物染色（如Ki-67、Caspase-3）验证类器官的活性及病理特征。

2. 药物处理与剂量设计：

   • 采用梯度浓度药物处理类器官（通常为6-8个浓度梯度），设置阴性对照（DMSO）和阳性对照（细胞毒性药物）。
   • 处理时间根据药物类型调整（24-120小时），模拟临床用药周期。

3. 终点与动态检测：

   • 终点法：使用CCK-8、ATP检测试剂或Calcein-AM/PI双染法评估细胞活性。
   • 动态监测：通过活细胞成像系统（如IncuCyte）连续记录类器官生长曲线及药物响应。

4. 数据分析：

   • 计算半数抑制浓度（IC50）和剂量-效应曲线，结合统计学方法（如ANOVA）评估组间差异。
   • 通过生物信息学工具（如R语言、GraphPad Prism）整合多组学数据，建立药物敏感性与基因突变的关联模型。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。