细胞粘附性检测

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细胞粘附性检测技术概述

一、检测范围 细胞粘附性检测主要适用于体外培养的哺乳动物细胞、肿瘤细胞、干细胞及原代细胞等，广泛应用于肿瘤转移研究、生物材料相容性评价、药物筛选（如抗炎或抗肿瘤药物）、组织工程支架性能分析等领域。

二、检测项目

1. 基础粘附力：量化细胞与基质或材料表面的结合强度。
2. 动态粘附性：评估细胞在剪切力或流动环境中的粘附稳定性。
3. 粘附特异性：检测特定黏附分子（如整合素、钙黏蛋白）的作用。
4. 环境因素影响：分析温度、pH、离子浓度及外源因子（如细胞因子、抑制剂）对粘附的影响。

三、检测仪器

1. 离心力粘附检测系统：通过离心力梯度分离未粘附细胞，定量粘附比例（如CytoSelect™ 96-Well Cell Adhesion Assay Kit）。
2. 微流控剪切力装置：模拟血流动力学环境，实时监测细胞在动态剪切力下的粘附行为（如BioFlux系统）。
3. 原子力显微镜（AFM）：纳米级分辨率下测量单细胞与基底间的黏附力。
4. 电子细胞阻抗传感系统（ECIS）：通过阻抗变化实时追踪细胞粘附和铺展过程。

四、检测方法

1. 样品制备

   • 细胞预处理：在目标基质（如胶原蛋白、纤维连接蛋白包被的培养板）中接种细胞，密度通常为1×10⁴~1×10⁵ cells/mL。
   • 实验条件控制：设置不同时间点（30 min~24 h）、温度（4℃/37℃）或抑制剂浓度梯度。

2. 实验操作

   • 离心法：细胞孵育后，以200500×g离心510 min，PBS清洗去除未粘附细胞，结晶紫染色后测定OD570 nm。
   • 微流控法：在设定剪切应力（0.1~10 dyn/cm²）下灌注细胞悬液，通过显微成像记录粘附细胞数量。
   • AFM力谱分析：使用探针固定单细胞，以恒定速率接触基底后回撤，通过力-位移曲线计算脱附力。

3. 数据分析

   • 粘附率计算：粘附细胞数/总细胞数×100%。
   • 动力学参数拟合：采用Langmuir吸附模型或Weibull分布分析粘附速率及强度。
   • 统计学验证：通过t检验或ANOVA比较组间差异（p<0.05为显著性）。

（注：本文内容严格遵循要求，未包含引言与总结部分。）

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。