蟾酥毒素检测

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蟾酥毒素检测范围 蟾酥毒素检测主要应用于中药材及中成药质量控制、食品安全监测、中毒事件分析及环境污染物筛查等领域。具体包括：1）中药材蟾酥及其制品（如六神丸、蟾酥丸等）；2）食品及保健品中非法添加的蟾酥成分；3）环境样本（如水、土壤）中蟾酥毒素污染；4）生物样本（血液、尿液）中蟾酥毒素的毒理学分析。检测需覆盖原料、半成品、成品及环境介质中的毒素残留。

蟾酥毒素检测项目 检测项目以蟾酥中主要毒性成分为核心，包括：

1. 蟾毒灵（Bufalin）：强心苷类毒素，具有显著心脏毒性；
2. 华蟾素（Cinobufagin）：甾体类毒素，影响神经系统；
3. 脂蟾毒配基（Resibufogenin）：强效致心律失常成分；
4. 总蟾毒内酯含量：综合评估样品毒性强度；
5. 相关代谢产物：如羟基化或葡萄糖醛酸结合物（针对生物样本）。

蟾酥毒素检测仪器

1. 高效液相色谱仪（HPLC）：用于分离和定量蟾酥毒素单体，配备紫外检测器（UV）或二极管阵列检测器（DAD）；
2. 液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS/MS）：高灵敏度检测痕量毒素及代谢物；
3. 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：适用于挥发性蟾酥毒素衍生物分析；
4. 紫外-可见分光光度计：快速筛查总蟾毒内酯含量；
5. 酶联免疫吸附检测仪（ELISA）：用于现场初筛，基于抗原-抗体反应。

蟾酥毒素检测方法

1. HPLC法

• 色谱条件：C18反相色谱柱（4.6×250 mm, 5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱），流速1.0 mL/min，检测波长296 nm。
• 样品前处理：样品经甲醇超声提取，离心后过0.22 μm滤膜进样。

2. HPLC-MS/MS法

• 质谱参数：电喷雾电离源（ESI+），多反应监测模式（MRM），定量离子对为蟾毒灵（m/z 385.2→369.1）、华蟾素（m/z 513.3→113.1）。
• 前处理：生物样本采用固相萃取（SPE）净化，以乙腈沉淀蛋白。

3. ELISA法

• 使用商业化蟾毒灵检测试剂盒，通过竞争法测定。样品经磷酸盐缓冲液稀释后，与辣根过氧化物酶标记抗体反应，显色后测定450 nm吸光度值。

4. 紫外分光光度法

• 基于蟾毒内酯在296 nm处的特征吸收，采用标准曲线法计算总含量。样品经乙醇提取后，过滤并稀释至线性范围（0.5~50 μg/mL）。

以上方法需通过加标回收实验验证准确性，回收率应达80%~120%，相对标准偏差（RSD）≤10%。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。