异常毒性检测

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异常毒性检测的范围与技术要求

一、检测范围 异常毒性检测主要应用于药品、生物制品、医疗器械及原料的生物学安全性评价，确保产品在临床应用或人体接触时无潜在毒性风险。具体包括：

1. 药品类：注射剂（如疫苗、抗生素）、中药提取物、基因治疗制剂等；
2. 医疗器械类：植入材料（如骨钉、心脏支架）、体外诊断试剂、一次性医用耗材；
3. 生物制品类：血液制品、细胞治疗产品、重组蛋白类药物；
4. 化工原料类：药用辅料、包装材料浸提液、生物降解材料。

二、检测项目 异常毒性检测的核心项目包括：

1. 急性全身毒性：通过体内外试验评估短期暴露下的毒性反应；
2. 细胞毒性：检测样品对哺乳动物细胞（如L929成纤维细胞）的增殖抑制或形态损伤；
3. 热原/内毒素：鲎试剂法（LAL）或家兔热原试验验证致热物质含量；
4. 遗传毒性：通过Ames试验、染色体畸变试验等评估基因突变风险；
5. 过敏反应：豚鼠最大化试验（GPMT）检测迟发型超敏反应。

三、检测仪器

1. 生物安全柜（Class II A2型）：用于无菌条件下处理毒性样品，防止交叉污染；
2. 全自动酶标仪（如BioTek Synergy H1）：定量分析细胞活性（MTT法）及内毒素含量；
3. 实时荧光定量PCR仪（QuantStudio系列）：检测细胞凋亡相关基因表达；
4. 流式细胞仪（BD FACSCelesta）：评估细胞周期阻滞及线粒体膜电位变化；
5. 动物实验设备：包括啮齿类动物隔离饲养系统、体温监测仪及自动注射装置。

四、检测方法

1. 体内法（动物试验）

   • 样品制备：按《中国药典》规定，将待测物溶解于生理盐水或植物油，设定高、中、低剂量组；
   • 动物模型：选用SPF级小鼠或家兔，腹腔或静脉注射给药，连续观察72小时；
   • 终点判定：记录动物死亡数、体重变化及行为学异常（如抽搐、呼吸困难）。

2. 体外法（细胞试验）

   • 细胞培养：L929细胞接种于96孔板，37℃、5% CO₂培养至80%融合度；
   • 暴露处理：加入梯度稀释样品，作用24小时后加入MTT试剂（终浓度0.5 mg/mL）；
   • 结果计算：DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪测定570 nm吸光度，IC50值＜80%即判定为细胞毒性阳性。

3. 内毒素检测

   • 凝胶法：将样品与鲎试剂（0.1 EU/mL灵敏度）混合，37℃水浴1小时，观察凝胶形成；
   • 动态显色法：通过标准曲线定量内毒素浓度，检测限需符合USP<85>标准（≤0.5 EU/mL）。

4. 数据验证

   • 采用阳性对照（如脂多糖、DMSO）及阴性对照（生理盐水）确保方法有效性；
   • 结果需满足GLP规范，通过重复试验（n≥3）及统计学分析（t检验或ANOVA）确认显著性差异。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。