致泻性大肠埃希氏菌检测

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致泻性大肠埃希氏菌检测范围 致泻性大肠埃希氏菌（Diarrheagenic Escherichia coli，DEC）的检测主要覆盖以下领域：

1. 食品卫生安全：包括生鲜肉类、乳制品、即食食品、果蔬及水产等食品中DEC的污染监测。
2. 临床诊断：针对腹泻患者的粪便样本，用于鉴别DEC引起的感染性腹泻。
3. 环境监测：如生活饮用水、地表水及污水处理系统中DEC的污染水平评估。
4. 公共卫生应急：在食源性疾病暴发或水源污染事件中，追踪病原体来源及传播途径。

致泻性大肠埃希氏菌检测项目 根据致病机制和毒力因子差异，DEC检测主要包括以下类别：

1. 产志贺毒素大肠埃希氏菌（STEC）：检测志贺毒素基因（stx1、stx2）及溶血素基因（hly）。
2. 肠致病性大肠埃希氏菌（EPEC）：鉴定紧密素基因（eae）和束状菌毛基因（bfp）。
3. 肠侵袭性大肠埃希氏菌（EIEC）：检测侵袭性基因（ipaH）。
4. 肠产毒性大肠埃希氏菌（ETEC）：分析耐热肠毒素（est）与不耐热肠毒素（elt）基因。
5. 肠集聚性大肠埃希氏菌（EAEC）：检测集聚性黏附菌毛基因（aggR）。

致泻性大肠埃希氏菌检测仪器

1. PCR仪：用于扩增目标毒力基因。
2. 实时荧光定量PCR仪（qPCR）：实现毒力基因的快速定量检测。
3. 电泳系统：分析PCR产物大小，验证目标基因是否存在。
4. 全自动微生物鉴定系统（如VITEK 2、MALDI-TOF MS）：用于菌株生化特征鉴定。
5. 酶标仪：用于酶联免疫吸附试验（ELISA）检测毒素或抗原。
6. 凝胶成像系统：记录电泳结果并生成报告。

致泻性大肠埃希氏菌检测方法

1. 样本前处理

   • 食品及环境样本：按GB 4789.6-2016标准进行均质、增菌（如用mEC肉汤或改良胰蛋白胨大豆肉汤）。
   • 临床样本：直接接种选择性培养基（如麦康凯琼脂）。

2. 分离与初步鉴定

   • 采用显色培养基（如CHROMagar™ DEC）或选择性培养基（MAC、CT-SMAC）分离可疑菌落。
   • 通过革兰氏染色、氧化酶试验及吲哚反应确认大肠埃希氏菌属。

3. 生化试验

   • 依据CLSI指南，进行糖发酵试验（如乳糖、山梨醇）、赖氨酸脱羧酶试验等。

4. 血清学分型

   • 使用多价及单价抗血清，通过玻片凝集试验鉴定O抗原（如O157:H7）。

5. 分子生物学检测

   • 多重PCR：同步检测多种毒力基因（如stx1、stx2、eae）。
   • 实时荧光PCR：基于TaqMan探针技术定量检测目标基因（参考ISO/TS 13136:2012）。

6. 毒素检测

   • Vero细胞毒性试验：验证STEC产志贺毒素的能力。
   • ELISA：检测样本中志贺毒素或热稳定性肠毒素。

7. 结果判读

   • 结合生化特征、血清型及毒力基因检测结果，依据GB 4789.6-2016或ISO 16654:2001标准判定DEC类别及致病性。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。