培养基支原体检测

阅读不方便？点击直接咨询工程师！

信息概要

培养基支原体检测标准主要依据《中华人民共和国药典》及国际通用微生物学检测规范，现行版本为2020年版《中国药典》通则1106支原体检查法，发布于2020年12月，目前仍为有效标准。该检测通过培养法、DNA荧光染色法或指示细胞培养法对生物制品、细胞培养物等样本中的支原体污染进行定性或定量分析，确保产品符合生物安全性要求。

检测项目

支原体存活率，菌落形态观察，DNA荧光染色阳性率，细胞培养污染率，代谢产物检测，pH变化监测，抗生素敏感性，特异性核酸序列检测，样本浊度分析，支原体种类鉴定，生长抑制试验，溶血活性检测，吸附特性分析，细胞病变效应评估，培养时间依赖性，温度敏感性测试，染色特性验证，培养基适应性，污染源追溯分析，交叉污染风险评估。

检测范围

细胞培养液，血清，疫苗，单克隆抗体，基因治疗产品，干细胞制品，生物反应器培养物，病毒载体，医疗器械冲洗液，组织工程材料，抗生素原料，诊断试剂，生物仿制药，发酵液，哺乳动物细胞系，昆虫细胞培养物，植物细胞提取物，临床样本（如关节液），生物安全柜环境样本，无菌隔离器内表面拭子。

检测方法

培养法：通过接种样本至专用支原体培养基，观察菌落形成及代谢变化。

DNA荧光染色法：使用Hoechst 33258荧光染料结合支原体DNA，通过显微镜检测荧光信号。

PCR扩增法：针对支原体16S rRNA基因设计引物进行特异性核酸扩增。

指示细胞培养法：将样本与Vero细胞共培养，观察细胞病变效应（CPE）。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：检测支原体特异性抗原或抗体。

代谢活性检测：通过培养基pH变化或ATP生物发光法评估支原体代谢。

流式细胞术：利用荧光标记抗体快速定量支原体污染水平。

电镜观察：直接观察样本中支原体的超微结构。

核酸杂交法：采用支原体特异性探针进行核酸杂交验证。

免疫荧光法：通过荧光标记抗体定位支原体抗原。

比浊法：测量培养基浊度变化以评估支原体增殖。

质谱分析：鉴定支原体特征性蛋白质或代谢产物。

药敏试验：测试支原体对常用抗生素的敏感性。

基因测序：对分离株进行全基因组或靶基因测序以确定种类。

溶血试验：检测支原体溶血素对红细胞的溶解活性。

检测仪器

荧光显微镜，PCR仪，酶标仪，流式细胞仪，生物安全柜，恒温培养箱，离心机，电泳仪，超净工作台，核酸提取仪，电镜，ATP生物发光检测仪，全自动微生物鉴定系统，pH计，分光光度计。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。