感染动物模型检测

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检测范围 感染动物模型检测主要针对实验动物（如小鼠、大鼠、家兔、非人灵长类等）在病原体感染后的生理、病理及免疫反应进行系统性分析。检测范围涵盖细菌、病毒、真菌及寄生虫感染模型，重点评估感染后动物的存活率、组织病理损伤、病原体载量、免疫应答及药物干预效果。实验动物需根据病原体特性选择适宜物种，例如免疫缺陷小鼠用于人源化病毒研究，家兔用于细菌性角膜炎模型等。

检测项目

1. 病理学检查：包括组织器官（如肺、肝、脾、脑等）的肉眼观察、HE染色切片分析及炎症评分。
2. 病原体载量检测：通过qPCR、ELISA或培养法定量血液、组织匀浆中的病原体核酸或抗原。
3. 免疫反应评估：检测血清抗体滴度（中和抗体、IgG/IgM）、细胞因子（IL-6、TNF-α等）及免疫细胞分型（流式细胞术）。
4. 临床症状监测：记录体重变化、活动状态、体温及特定感染体征（如呼吸频率、神经系统症状）。
5. 药物浓度与组织分布：对给药动物的血液、靶器官进行HPLC或LC-MS/MS分析，评估药代动力学特性。
6. 分子生物学检测：包括宿主基因表达（RT-qPCR、Western blot）及病原体耐药基因突变筛查。

检测仪器

1. 实时荧光定量PCR仪（qPCR）：用于病原体核酸定量及宿主基因表达分析。
2. 全自动酶标仪：检测ELISA板中的抗体、抗原及细胞因子浓度。
3. 流式细胞仪：分析免疫细胞亚群比例及活化标志物。
4. 病理切片机与显微镜：制备组织切片并进行病理学评分。
5. 高效液相色谱仪（HPLC）及液质联用仪（LC-MS/MS）：测定血液或组织中的药物浓度。
6. 生物安全柜及CO₂培养箱：用于病原体分离及细胞培养实验。

检测方法

1. 病原体载量测定：采集感染动物血液或组织样本，匀浆后提取DNA/RNA，通过qPCR扩增病原体特异性基因（如病毒基因ORF1ab、细菌16S rRNA），采用标准曲线法计算拷贝数。
2. 组织病理学分析：取靶器官固定于4%多聚甲醛，石蜡包埋后切片（厚度4-5 μm），HE染色观察炎症、坏死或纤维化病变，按国际标准进行半定量评分（如0-4分制）。
3. 免疫学检测：
   • 血清抗体：间接ELISA法，包被病原体抗原，加入梯度稀释血清，HRP标记二抗显色后测定OD450 nm值。
   • 细胞因子：采用Luminex多因子检测技术或ELISA试剂盒定量分析。
4. 流式细胞术：取脾脏或外周血单个核细胞，经荧光标记抗体（如CD3、CD4、CD8）染色，上机分析T细胞亚群比例及活化标记（CD69、CD25）。
5. 药代动力学研究：尾静脉或眼眶采血，离心后取血浆，经乙腈沉淀蛋白，LC-MS/MS检测药物代谢产物，使用WinNonlin软件计算AUC、Cmax等参数。
6. 耐药基因检测：对分离病原体进行全基因组测序（Illumina平台），通过BLAST比对分析突变位点（如流感病毒NA蛋白H275Y突变）。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。