实验动物的疾病模型检测

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检测范围

实验动物疾病模型的检测范围涵盖常见疾病类型，包括但不限于：

1. 神经退行性疾病模型：如阿尔茨海默病（APP/PS1转基因小鼠）、帕金森病（MPTP诱导小鼠或大鼠）；
2. 心血管疾病模型：如心肌缺血再灌注损伤（冠状动脉结扎大鼠）、动脉粥样硬化（ApoE-/-小鼠）；
3. 代谢性疾病模型：如2型糖尿病（高脂饮食联合链脲佐菌素诱导小鼠）、肥胖症（ob/ob或db/db基因突变小鼠）；
4. 肿瘤模型：如皮下移植瘤（裸鼠移植人源肿瘤细胞系）、基因编辑自发肿瘤模型（如KRAS突变小鼠）；
5. 免疫性疾病模型：如类风湿关节炎（胶原诱导性关节炎小鼠）、系统性红斑狼疮（MRL/lpr小鼠）。

检测项目

1. 生理指标检测：

   • 基础生理参数：体温、心率、呼吸频率、血压；
   • 体重变化、摄食量、饮水量监测；
   • 器官系数（心、肝、脾、肺、肾等脏器重量与体重比值）。

2. 生化指标检测：

   • 血液学分析：全血细胞计数（红细胞、白细胞、血小板）、血红蛋白浓度；
   • 血清生化：血糖、血脂（TG、TC、LDL、HDL）、肝功能（ALT、AST）、肾功能（BUN、Cr）；
   • 尿液分析：尿蛋白、尿糖、尿肌酐。

3. 组织病理学检测：

   • 苏木精-伊红（HE）染色观察组织炎症、坏死或纤维化；
   • 特殊染色：Masson染色（胶原纤维）、刚果红染色（淀粉样沉积）、免疫组化（特定蛋白定位）；
   • 病理评分系统（如关节炎模型关节破坏评分、肿瘤组织坏死面积占比）。

4. 行为学评估：

   • 神经功能：Morris水迷宫（空间学习记忆）、旷场实验（焦虑与自主活动）；
   • 运动功能：转棒实验（协调性）、步态分析（足印测试）。

5. 分子生物学检测：

   • 基因表达：qPCR、RNA-seq检测疾病相关基因（如炎症因子IL-6、TNF-α）；
   • 蛋白水平：Western Blot、ELISA检测靶蛋白表达（如Aβ蛋白、Tau蛋白磷酸化）；
   • 代谢组学：LC-MS/MS分析血浆或组织代谢物变化。

检测仪器

1. 生理指标监测：

   • 无创血压仪（Softron BP-98A）、红外体温计；
   • 代谢笼系统（Tecniplast）用于摄食量及排泄物监测。

2. 生化分析：

   • 全自动血液分析仪（Sysmex XN-1000）；
   • 全自动生化分析仪（Hitachi 7180）；
   • 尿液分析仪（URIT-500B）。

3. 组织病理学设备：

   • 石蜡切片机（Leica RM2235）、冷冻切片机（Leica CM1950）；
   • 光学显微镜（Olympus BX53）配合显微成像系统（CellSens）；
   • 数字病理扫描仪（Hamamatsu NanoZoomer）。

4. 行为学设备：

   • Morris水迷宫（ZS-001）、旷场实验箱（MED-OFA-510）；
   • 转棒仪（Ugo Basile 47600）、步态分析系统（CatWalk XT）。

5. 分子生物学仪器：

   • 实时荧光定量PCR仪（Bio-Rad CFX96）；
   • 蛋白电泳系统（Bio-Rad Mini-PROTEAN）；
   • 液相色谱-质谱联用仪（Agilent 6495C）。

检测方法

1. 生理指标监测：

   • 麻醉动物后，通过尾动脉或无创袖带法测量血压，连续记录3次取平均值；
   • 代谢笼单独饲养动物，连续采集24小时摄食、饮水量及尿液数据。

2. 生化样本处理：

   • 眼眶采血或腹主动脉取血，离心（3000 rpm, 15分钟）分离血清；
   • 全血样本抗凝处理后30分钟内上机检测；
   • 尿液经离心（2000 rpm, 10分钟）去除沉淀后分析。

3. 组织病理学流程：

   • 取目标组织（如脑、心脏、肿瘤）经4%多聚甲醛固定24小时，梯度乙醇脱水，石蜡包埋；
   • 切片厚度4 μm，HE染色后由两名病理医师双盲评分；
   • 免疫组化采用抗原修复（柠檬酸缓冲液，95℃ 20分钟），一抗孵育（4℃过夜），DAB显色。

4. 行为学测试规范：

   • Morris水迷宫：连续5天训练，记录逃避潜伏期及目标象限停留时间；
   • 转棒实验：预适应10分钟，正式测试以转速从4 rpm逐步加速至40 rpm，记录跌落时间。

5. 分子生物学实验：

   • qPCR：TRIzol法提取RNA，逆转录为cDNA，SYBR Green法扩增，2^(-ΔΔCt)计算基因相对表达量；
   • Western Blot：RIPA裂解组织，BCA法定量蛋白，SDS-PAGE电泳转膜，5%脱脂牛奶封闭，ECL显影。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。