桥本氏甲状腺炎动物模型检测

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检测范围

桥本氏甲状腺炎动物模型的检测范围涵盖以下阶段及生物学指标：

1. 模型构建阶段：验证动物（如NOD小鼠、碘过量诱导模型）是否成功模拟桥本氏甲状腺炎的病理特征，包括甲状腺淋巴细胞浸润、滤泡破坏及纤维化。
2. 疾病进展阶段：监测甲状腺功能减退（如血清T3、T4下降，TSH升高）和自身免疫反应（如抗甲状腺过氧化物酶抗体TPOAb、抗甲状腺球蛋白抗体TgAb水平）。
3. 干预治疗阶段：评估药物（如硒制剂、糖皮质激素）或基因治疗对甲状腺炎症、激素水平及免疫调节的影响。

检测项目

1. 血清学指标
   • 甲状腺功能：总三碘甲状腺原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）、促甲状腺激素（TSH）。
   • 自身抗体：抗TPO抗体（TPOAb）、抗Tg抗体（TgAb）。
   • 炎症因子：IL-6、TNF-α、IFN-γ。
2. 组织病理学分析
   • 甲状腺组织H&E染色：观察淋巴细胞浸润程度、滤泡结构破坏及纤维化。
   • 免疫组化染色：检测CD4+ T细胞、CD8+ T细胞及B细胞（CD20+）浸润情况。
3. 免疫学指标
   • 流式细胞术：Th1/Th2/Th17/Treg细胞比例分析。
   • 氧化应激标志物：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。
4. 基因表达
   • RT-qPCR检测：Foxp3、IL-10、TGF-β等免疫调节基因表达水平。

检测仪器

1. 血清学检测：全自动生化分析仪（如Hitachi 7080）、酶标仪（ELISA检测，如BioTek Synergy H1）。
2. 组织病理学：石蜡切片机（Leica RM2235）、光学显微镜（Olympus BX53）、数字病理扫描仪（Aperio AT2）。
3. 免疫学分析：流式细胞仪（BD FACSCanto II）、荧光显微镜（Nikon Eclipse Ti）。
4. 基因表达：实时荧光定量PCR仪（Applied Biosystems QuantStudio 5）、核酸提取仪（Qiagen QIAcube）。
5. 氧化应激检测：紫外分光光度计（Thermo Scientific NanoDrop 2000）。

检测方法

1. 血清学检测
   • 甲状腺激素及TSH：采用化学发光免疫分析法（CLIA），试剂盒按说明书操作，血清样本稀释比为1:10。
   • 自身抗体检测：间接ELISA法，包被TPO或Tg抗原，以OD450 nm值计算抗体滴度。
2. 组织病理学分析
   • H&E染色：取甲状腺组织固定于4%多聚甲醛，石蜡包埋后切片（4 μm厚度），苏木精-伊红染色，显微镜下评分（0-4级：无浸润至广泛浸润）。
   • 免疫组化：一抗选用CD4（1:200）、CD8（1:150），DAB显色，ImageJ软件定量阳性细胞比例。
3. 流式细胞术
   • 脾脏单细胞悬液经Ficoll分离，抗CD4-FITC、CD25-PE、Foxp3-APC抗体标记，流式分析Treg细胞占比。
4. 基因表达分析
   • RNA提取（TRIzol法），逆转录为cDNA，SYBR Green法扩增目标基因，以β-actin为内参，2−ΔΔCt法计算相对表达量。
5. 氧化应激检测
   • MDA：硫代巴比妥酸法，532 nm波长比色；SOD：黄嘌呤氧化酶法，测定抑制率（%）。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。