狼疮小鼠模型检测

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狼疮小鼠模型检测内容

一、检测范围

1. 样本类型：血清、尿液、肾脏组织、脾脏及淋巴结。
2. 检测对象：系统性红斑狼疮（SLE）模型小鼠（如MRL/lpr、NZB/NZW F1等品系）。
3. 时间节点：疾病进展不同阶段（如8周龄、12周龄、16周龄）。

二、检测项目

1. 免疫学指标

   • 血清抗双链DNA（抗dsDNA）抗体水平
   • 补体C3、C4浓度
   • 促炎细胞因子（如IL-6、TNF-α、IFN-γ）及抗炎细胞因子（如IL-10）
   • 免疫细胞亚群分析（T细胞、B细胞、单核细胞、调节性T细胞）

2. 肾脏功能与损伤标志物

   • 尿蛋白定量（24小时尿蛋白）
   • 血清肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）
   • 肾脏组织病理学评分（肾小球炎症、免疫复合物沉积）

3. 脏器特征分析

   • 脾脏指数（脾脏重量/体重）及淋巴结肿大程度
   • 脾脏和淋巴结淋巴细胞增殖活性

三、检测仪器

1. 免疫学检测

   • ELISA检测仪（如BioTek Synergy H1）
   • 流式细胞仪（如BD FACSCanto II）
   • 全自动生化分析仪（如Hitachi 7020）

2. 组织病理学分析

   • 光学显微镜（如Olympus BX53）
   • 免疫荧光显微镜（如Leica DM6）
   • 组织切片机（如Leica RM2235）

3. 分子生物学辅助设备

   • 分光光度计（如NanoDrop 2000）
   • 低温高速离心机（如Eppendorf 5430R）

四、检测方法

1. 样本采集与预处理

   • 血清分离：眼眶取血后静置30分钟，3000 rpm离心15分钟，取上清。
   • 尿液收集：代谢笼采集24小时尿液，离心去除沉淀后检测蛋白浓度。
   • 组织固定：肾脏、脾脏经4%多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋或冷冻切片。

2. 免疫学检测流程

   • 抗dsDNA抗体检测：ELISA法，包被dsDNA抗原，加入稀释血清，二抗孵育后读取OD450 nm值。
   • 细胞因子定量：多重液相芯片技术（Luminex）或ELISA试剂盒。
   • 流式细胞术：取脾脏单细胞悬液，CD3/CD4/CD25/FoxP3抗体标记，分析Treg细胞比例。

3. 肾脏病理学评估

   • HE染色：石蜡切片脱蜡后苏木素-伊红染色，评估肾小球炎症和间质纤维化。
   • 免疫荧光染色：IgG/IgM/C3抗体标记冰冻切片，观察免疫复合物沉积（荧光强度量化）。

4. 功能指标分析

   • 尿蛋白定量：磺基水杨酸法或BCA法。
   • 生化指标检测：全自动生化仪检测SCr、BUN。
   • 脾脏指数计算：脾脏湿重（mg）与体重（g）比值。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。