斑马鱼毒理学检测

(CMA)     (ISO) (高新技术企业)

斑马鱼毒理学检测范围 斑马鱼毒理学检测广泛应用于药物开发、环境污染物评估、化学品安全性评价、化妆品成分测试等领域。其检测范围涵盖急性毒性、发育毒性、神经毒性、生殖毒性及遗传毒性等研究，适用于水体污染物、纳米材料、农药残留、工业化学品及生物制品的毒理机制分析。

检测项目

1. 急性毒性测试：通过观察斑马鱼胚胎或幼鱼的死亡率、心跳速率、孵化延迟等指标，测定半数致死浓度（LC50）或半数效应浓度（EC50）。
2. 发育毒性评价：分析胚胎畸形率（如心包水肿、脊柱弯曲）、器官发育异常（脑、心脏、肝脏）及体节形成缺陷。
3. 神经毒性检测：评估运动行为异常（如游动频率降低）、神经元损伤及乙酰胆碱酯酶活性变化。
4. 生殖毒性研究：检测性腺发育异常、产卵量减少及生殖相关基因（如vtg、cyp19a1）表达水平变化。
5. 遗传毒性分析：通过彗星实验或转基因斑马鱼模型（如Tg[fli1:EGFP]）检测DNA损伤及基因突变。

检测仪器

1. 体视显微镜（如Olympus SZX16）：用于观察胚胎形态学变化及器官发育状态。
2. 显微注射系统（如Eppendorf FemtoJet）：用于胚胎期化学物质或基因的精准导入。
3. 多功能酶标仪（如BioTek Synergy H1）：定量检测生化指标（如活性氧ROS、ATP含量）。
4. 实时荧光定量PCR仪（如ABI QuantStudio）：分析毒性相关基因表达差异。
5. 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）：测定斑马鱼体内化学物质代谢产物浓度。
6. 行为分析系统（如Zebralab）：追踪幼鱼游动轨迹及运动行为参数。

检测方法

1. 胚胎暴露实验：选取受精后6小时（6 hpf）的斑马鱼胚胎，置于含梯度浓度受试物的培养液中，于28.5℃恒温避光培养。
2. 终点观察与采样：
   • 急性毒性：24-96小时内记录死亡率和畸形率，计算LC50（概率单位法）。
   • 组织切片：固定胚胎（4%多聚甲醛），石蜡包埋后切片（厚度5 μm），H&E染色观察组织病理学变化。
   • 荧光标记：利用转基因品系（如Tg[flk1:EGFP]）活体成像血管发育异常。
3. 分子生物学分析：提取胚胎RNA，通过qPCR检测氧化应激（sod、cat）、凋亡（bax、bcl-2）及炎症因子（il-1β、tnf-α）表达水平。
4. 行为学评估：幼鱼（120 hpf）置于多孔板中，记录光照-黑暗交替刺激下的运动轨迹，分析游动速度、距离及转向频率。
5. 数据分析：采用GraphPad Prism软件进行ANOVA方差分析及Dunnett’s多重比较，结果以均值±标准差表示（p<0.05为显著差异）。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。