微生物量碳检测

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微生物量碳检测范围 微生物量碳检测主要应用于土壤、水体、沉积物、堆肥、生物膜等环境样本的分析，涵盖农业、生态修复、污水处理、有机废弃物管理等领域。针对不同基质，检测范围包括表层土壤（0-20 cm）、深层土壤（20-50 cm）、淡水/海水体悬浮颗粒物、活性污泥及有机废弃物发酵产物等。

检测项目

1. 微生物量碳（MBC）含量：单位质量样品中微生物细胞所含有机碳总量。
2. 活性微生物碳比例：可代谢碳占总微生物量碳的百分比。
3. 有机碳转化速率：单位时间内微生物对有机碳的分解与转化效率。
4. 微生物代谢熵（qCO₂）：单位微生物量碳释放的二氧化碳量，反映微生物代谢活性。

检测仪器

1. 总有机碳（TOC）分析仪：测定提取液中的有机碳浓度（如岛津TOC-L系列）。
2. 熏蒸提取装置：用于氯仿熏蒸法处理样品（含真空干燥器与恒温箱）。
3. 高速离心机：转速≥10,000 rpm，分离微生物细胞与提取液（如Eppendorf 5430R）。
4. 恒温振荡培养箱：控制培养温度（25-30℃）与振荡频率（180 rpm）。
5. 分光光度计：测定显色反应产物的吸光度（波长范围400-600 nm）。
6. 荧光显微镜结合染色技术：用于活性微生物细胞计数（如SYBR Green染色）。

检测方法

1. 熏蒸提取-硫酸钾浸提法

   • 取新鲜样品10 g，置于真空干燥器中氯仿熏蒸24小时（25℃）。
   • 熏蒸后加入0.5 mol/L K₂SO₄溶液（1:4 w/v），振荡30分钟（200 rpm）。
   • 离心（10,000 rpm, 15分钟），上清液过0.45 μm滤膜，TOC分析仪测定碳含量。
   • 计算：MBC=（熏蒸样碳含量－未熏蒸样碳含量）/0.45（转换系数）。

2. 底物诱导呼吸法（SIR）

   • 称取5 g样品，添加葡萄糖溶液（200 mg C/g干样）。
   • 密闭培养24小时（22℃），红外气体分析仪监测CO₂累积量。
   • 根据呼吸速率推算活性微生物碳（公式：MBC=40.04µl CO₂·h⁻¹·g⁻¹）。

3. 氯仿熏蒸浸提-比色法

   • 熏蒸样品浸提液加入磷酸缓冲液（pH 6.8）与K₂Cr₂O₄-H₂SO₄氧化剂。
   • 沸水浴消化30分钟，冷却后加入二苯胺指示剂，分光光度计测定600 nm吸光度。
   • 通过标准曲线计算可氧化碳含量。

4. 磷脂脂肪酸法（PLFA）

   • 采用Bligh-Dyer法提取样品中磷脂脂肪酸。
   • 甲基化处理后，GC-MS分析特定脂肪酸标记物（如16:0、18:1ω9c）。
   • 通过总PLFA碳当量估算微生物生物量（转换系数：2.5 nmol PLFA=1 μg C）。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。