蛋白质结构检测

(CMA)     (ISO) (高新技术企业)

检测范围

蛋白质结构检测涵盖从一级到四级结构的全面分析，包括：

1. 一级结构：氨基酸序列、化学修饰（如磷酸化、糖基化）及翻译后修饰位点鉴定。
2. 二级结构：α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲等局部空间构象的定量分析。
3. 三级结构：蛋白质单体的整体三维构象，包括结构域排布及活性位点定位。
4. 四级结构：多亚基蛋白的组装模式及亚基间相互作用。
5. 复合物结构：蛋白质与配体（如核酸、小分子药物）的互作界面及结合方式。

检测项目

1. 一级结构分析：氨基酸组成、序列覆盖率、修饰位点鉴定。
2. 二级结构含量测定：α螺旋、β折叠等构象的占比及稳定性评估。
3. 三维结构解析：原子级分辨率下的空间坐标、氢键网络及疏水核心分布。
4. 动态结构分析：构象变化（如变构效应）、柔性区域及折叠/解折叠动力学。
5. 相互作用研究：结合亲和力（Kd值）、结合位点拓扑学及能量分布。

检测仪器

1. 一级结构检测：
   • 质谱仪（MALDI-TOF、LC-MS/MS）用于序列及修饰分析。
   • 毛细管电泳仪（CE）用于纯度及分子量验证。
2. 二级结构检测：
   • 圆二色光谱仪（CD）用于溶液环境下的构象分析。
   • 傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）测定酰胺I带特征峰。
3. 高级结构解析：
   • X射线晶体衍射仪（分辨率达0.1 nm级）。
   • 核磁共振波谱仪（NMR，适用于液态动态结构）。
   • 冷冻电镜（Cryo-EM，用于大分子复合物近原子级成像）。
4. 相互作用与动力学：
   • 表面等离子体共振仪（SPR）实时监测结合动力学。
   • 等温滴定量热仪（ITC）测定热力学参数。
   • 分子动力学模拟软件（如GROMACS、AMBER）。

检测方法

1. 一级结构检测：
   • Edman降解：N端序列逐步测定。
   • 肽质量指纹图谱（PMF）：酶解后通过质谱匹配数据库。
2. 二级结构检测：
   • 圆二色光谱法：190-250 nm波段拟合构象占比。
   • 红外光谱去卷积：酰胺I带（1600-1700 cm⁻¹）分峰定量。
3. 三级/四级结构检测：
   • X射线晶体学：晶体衍射数据经PHASER/MOLREP解析。
   • 冷冻电镜单颗粒分析：百万级颗粒分类及3D重构（RELION）。
4. 动态结构分析：
   • 氢氘交换质谱（HDX-MS）：追踪溶剂暴露区域的构象变化。
   • 荧光共振能量转移（FRET）：实时监测结构域间距离波动。
5. 互作界面定位：
   • 交联质谱（XL-MS）：化学交联剂捕获空间邻近残基。
   • 丙氨酸扫描突变：关键结合残基的能效验证。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。