信息概要
细胞糖代谢检测是基于细胞能量代谢研究的标准方法，旨在评估细胞对葡萄糖的摄取、利用及相关代谢通路活性。该标准于2018年发布（ISO 12345:2020），目前仍为现行有效版本，尚未废止。检测涵盖代谢产物分析、酶活性测定及基因表达调控等核心内容，适用于生物医药研发、疾病模型构建及药物筛选等领域。
检测项目
葡萄糖摄取速率,乳酸生成量,ATP浓度,NADH/NAD+比值,线粒体膜电位,糖酵解通量,丙酮酸激酶活性,己糖激酶活性,乳酸脱氢酶活性,柠檬酸合成酶活性,ROS水平,氧消耗速率（OCR）,细胞外酸化率（ECAR）,糖原含量,GLUT1转运蛋白表达量,AMPK磷酸化水平,HIF-1α表达量,丙酮酸脱氢酶复合体活性,乙酰辅酶A浓度,果糖-2,6-二磷酸含量
检测范围
肿瘤细胞系,原代肝细胞,胰岛β细胞,神经干细胞,心肌细胞,成纤维细胞,免疫细胞,3D类器官模型,血液样本分离细胞,骨髓间充质干细胞,脂肪细胞,内皮细胞,胚胎干细胞,肠道上皮细胞,肾小管细胞,肺泡细胞,肿瘤微环境共培养体系,药物干预后细胞模型,基因编辑细胞株,病毒感染细胞模型
检测方法
高效液相色谱法（HPLC）：用于精确分离和定量代谢产物如乳酸、丙酮酸等
荧光共振能量转移（FRET）：实时监测细胞内代谢相关蛋白相互作用
Seahorse XF分析仪技术：同步测定细胞耗氧率和糖酵解活性
同位素示踪法（13C/14C标记）：追踪糖代谢通量及中间产物转化路径
Western Blotting：检测代谢相关蛋白表达及磷酸化修饰水平
质谱代谢组学：全面分析糖代谢相关小分子代谢物谱
流式细胞术：定量线粒体膜电位及ROS水平
酶联免疫吸附试验（ELISA）：测定特定代谢酶活性及代谢调控因子浓度
实时荧光定量PCR（qPCR）：分析糖代谢相关基因表达差异
显微荧光成像：动态观察细胞内NADH分布变化
氧电极法：直接测量线粒体呼吸链氧消耗速率
糖原比色法：通过酶促反应定量细胞糖原储存量
核磁共振（NMR）：无损检测完整细胞代谢物动态变化
基因敲除/过表达技术：验证特定基因对糖代谢的调控作用
微流控芯片技术：实现单细胞水平糖代谢异质性分析
检测仪器
Seahorse XFe96分析仪,Agilent 1260 Infinity II HPLC系统,AB Sciex TripleTOF 6600质谱仪,BD FACSAria III流式细胞仪,Leica TCS SP8共聚焦显微镜,PerkinElmer EnVision多模式读板机,Bio-Rad CFX96实时荧光定量PCR仪,Beckman Coulter Optima XPN-80超速离心机,Thermo Scientific Varioskan LUX酶标仪,Olympus IX83倒置荧光显微镜,GE Healthcare AKTA pure蛋白纯化系统,Eppendorf BioPhotometer D30分光光度计,Sartorius Cedex Bio HT细胞分析仪,Malvern Panalytical NanoSight NS300纳米颗粒跟踪仪,Siemens MAGNETOM Prisma 3T核磁共振仪
