细胞铁含量检测

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细胞铁含量检测范围 细胞铁含量检测适用于多种生物样本，包括体外培养的哺乳动物细胞（如HeLa、HEK293、原代细胞等）、血液细胞（红细胞、白细胞）、组织分离细胞（如肝细胞、神经元）以及病理状态下的细胞（如肿瘤细胞、铁过载或缺乏的细胞模型）。检测范围涵盖细胞内总铁、游离铁（亚铁离子Fe²⁺、高铁离子Fe³⁺）、铁储存蛋白（如铁蛋白）及铁代谢相关酶活性分析。

细胞铁含量检测项目

1. 总铁含量：测定细胞内铁元素的总量，包括结合态和游离态铁。
2. 游离铁离子浓度：区分Fe²⁺与Fe³⁺的浓度，评估细胞内氧化还原状态。
3. 铁蛋白含量：检测铁储存蛋白的表达水平，反映细胞铁稳态。
4. 铁代谢相关酶活性：如血红素加氧酶（HO-1）、铁调素（Hepcidin）等。
5. 铁转运蛋白表达：如转铁蛋白受体（TfR1）、二价金属离子转运蛋白（DMT1）等。

细胞铁含量检测仪器

1. 原子吸收光谱仪（AAS）：用于高灵敏度测定总铁含量，检测限可达0.1 μg/L。
2. 电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）：实现多元素同时检测，适用于痕量铁分析。
3. 分光光度计：基于比色法（如Ferrozine法）检测Fe²⁺或总铁含量。
4. 荧光分光光度计：结合铁离子荧光探针（如Calcein-AM、Phen Green SK）定量游离铁。
5. 流式细胞仪：通过铁特异性荧光染料（如RPA、Rhodamine B）进行单细胞水平铁含量分析。
6. 显微成像系统：用于组织切片或活细胞中铁分布的定性或半定量分析（如普鲁士蓝染色）。

细胞铁含量检测方法

1. 比色法（Ferrozine法）

   • 步骤：裂解细胞后，加入盐酸羟胺将Fe³⁺还原为Fe²⁺，与Ferrozine试剂反应生成紫色络合物，于562 nm波长下测定吸光度。
   • 标准曲线：使用硫酸亚铁铵溶液建立浓度-吸光度标准曲线。

2. 原子吸收光谱法（AAS）

   • 样品制备：细胞经硝酸-过氧化氢微波消解后，定容至适宜体积。
   • 检测参数：波长248.3 nm，狭缝宽度0.2 nm，火焰类型为空气-乙炔。

3. 荧光探针法

   • 探针加载：将Calcein-AM（1 μM）与细胞共孵育30分钟，洗涤后检测荧光强度（激发/发射波长：490/515 nm）。
   • 铁竞争实验：加入铁螯合剂（如DFO）后荧光恢复，计算游离铁浓度。

4. 组织化学染色法

   • 普鲁士蓝染色：固定细胞或组织切片，用2%亚铁氰化钾与2%盐酸等体积混合液染色20分钟，显微镜下观察蓝色颗粒（Fe³⁺沉淀）。

5. 流式细胞术

   • 染色步骤：细胞与RPA（1 μM）室温避光孵育15分钟，PBS洗涤后上机检测（FL2通道）。
   • 数据分析：通过荧光强度直方图比较不同处理组铁含量差异。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。