细胞微核检测

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细胞微核检测范围 细胞微核检测适用于评估遗传毒性和染色体损伤风险，主要应用于以下领域：

1. 遗传毒理学研究：评价化学物质、药物或辐射对遗传物质的损伤程度。
2. 环境监测：检测空气、水体及土壤污染物（如重金属、农药）的致突变性。
3. 职业健康评估：分析长期接触工业毒物或放射线的工作人员的染色体稳定性。
4. 临床医学：监测癌症患者放射治疗或化疗后的遗传损伤及恢复情况。
5. 食品安全：评估食品添加剂、包装材料迁移物的潜在遗传毒性。

检测项目

1. 微核发生率：统计样本中携带微核的细胞比例，反映遗传损伤水平。
2. 微核类型分析：区分微核来源（染色体断片或整条染色体异常）。
3. 细胞增殖指数：通过细胞分裂频率评估受试物对细胞活性的影响。
4. 剂量-效应关系：分析不同浓度受试物与微核形成的相关性。
5. 统计显著性：通过对照组与实验组的差异验证结果的可靠性。

检测仪器

1. 荧光显微镜：用于观察经荧光染料（如DAPI、AO）标记的微核。
2. 全自动细胞成像分析系统（如Metafer、PathFinder）：高通量扫描玻片并自动识别微核。
3. 流式细胞仪：通过荧光标记快速筛选微核阳性细胞群体。
4. 离心机与恒温培养箱：用于细胞分离、培养及同步化处理。
5. 生物安全柜与CO₂培养箱：保障细胞操作的无菌环境及适宜生长条件。

检测方法

1. 样本制备：
   • 人体样本：采集外周血淋巴细胞，经肝素抗凝后分离单个核细胞。
   • 动物或体外模型：选择骨髓细胞、脾淋巴细胞或特定细胞系（如CHL、V79）。
2. 细胞处理与培养：
   • 加入受试物后，于37℃、5% CO₂条件下培养24-72小时。
   • 使用细胞松弛素B阻断胞质分裂，区分单核与双核细胞。
3. 固定与染色：
   • 细胞经低渗处理（0.075M KCl）后，甲醇-冰醋酸（3:1）固定。
   • 吉姆萨染色法（2-5% Giemsa溶液）或荧光染色法标记DNA。
4. 镜检与数据分析：
   • 依据国际标准（ISO 21427），双盲法计数至少2000个双核细胞中的微核数。
   • 判定标准：微核直径≤主核1/3，与主核无重叠，边界清晰。
   • 采用SPSS或GraphPad软件进行统计学分析（t检验、ANOVA）。

（注：以上内容依据ISO 21427、OECD 487等标准编写，确保方法学合规性。）

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。