信号通路毒性测试

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信息概要

信号通路毒性测试是一种评估外源性化合物或药物对细胞信号转导通路影响的毒理学检测服务。该测试通过分析关键信号分子（如激酶、受体、转录因子）的活性、表达水平及相互作用变化，系统衡量受试物是否干扰细胞正常生理功能，从而预测其潜在毒性风险。检测对于药物研发、化学品安全性评价及环境毒理研究至关重要，可早期识别化合物可能引发的细胞应激、凋亡、增殖异常或致癌性等不良反应，显著降低研发失败率并保障公共健康安全。

检测项目

细胞增殖活性，细胞凋亡率，信号通路关键蛋白磷酸化水平，受体激活状态，第二信使浓度，转录因子核转位，基因表达谱变化，蛋白相互作用强度，细胞周期分布，氧化应激指标，炎症因子释放，DNA损伤响应，自噬流评估，代谢酶活性，膜电位稳定性，钙离子内流动态，细胞迁移能力，细胞形态学变化，线粒体功能完整性，细胞色素释放

检测范围

GPCR通路毒性测试，MAPK通路毒性测试，JAK-STAT通路毒性测试，NF-κB通路毒性测试，Wnt通路毒性测试，Hedgehog通路毒性测试，TGF-β通路毒性测试，PI3K-Akt通路毒性测试，Notch通路毒性测试，凋亡信号通路毒性测试，自噬通路毒性测试，细胞周期通路毒性测试，DNA损伤响应通路毒性测试，氧化应激通路毒性测试，内质网应激通路毒性测试，炎症信号通路毒性测试，代谢通路毒性测试，神经信号通路毒性测试，免疫信号通路毒性测试，激素信号通路毒性测试

检测方法

Western Blotting：通过特异性抗体检测信号通路中蛋白质的表达与磷酸化水平。

ELISA：定量分析信号通路相关细胞因子或磷酸化蛋白的浓度。

流式细胞术：高通量检测细胞表面受体表达及细胞内信号分子活性。

免疫荧光染色：可视化观察信号蛋白的亚细胞定位及通路激活状态。

实时荧光定量PCR：测量信号通路下游基因的转录水平变化。

报告基因检测：利用荧光或酶活性评估特定信号通路的转录活性。

激酶活性测定：通过底物磷酸化反应直接量化激酶功能。

蛋白质组学分析：全面筛查信号通路相关蛋白的丰度与修饰变化。

细胞活力检测：采用CCK-8或MTT法评估毒性对细胞增殖的影响。

凋亡检测：使用Annexin V/PI双染法量化细胞凋亡程度。

钙成像技术：实时监测信号通路中钙离子动态波动。

高通量筛选：自动化平台并行测试多个化合物对通路的影响。

基因敲除/沉默技术：通过CRISPR或RNA干扰验证通路特异性毒性。

代谢物分析：检测信号通路相关小分子代谢物的浓度变化。

电生理记录：适用于神经信号通路毒性的膜电位与离子通道评估。

检测仪器

流式细胞仪，酶标仪，荧光显微镜，激光共聚焦显微镜，Western Blot成像系统，实时荧光定量PCR仪，高效液相色谱仪，质谱仪，细胞培养箱，微量板离心机，电泳系统，蛋白印迹转膜仪，化学发光检测仪，细胞计数仪，钙离子成像系统

问：信号通路毒性测试在药物研发中如何降低临床失败风险？答：通过早期识别化合物对关键信号通路的干扰，可预测器官毒性或致癌性，避免投入高成本临床阶段。 问：哪些信号通路毒性测试适用于神经类药物安全性评估？答：常检测GPCR、钙信号及凋亡通路，重点评估神经递质受体活性和神经元存活率。 问：环境污染物筛查为何需要信号通路毒性测试？答：能快速揭示低剂量污染物对细胞应激通路的潜在影响，弥补传统毒性测试的灵敏度不足。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。