钙调蛋白检测

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钙调蛋白检测技术要点

检测范围

钙调蛋白（Calmodulin, CaM）检测主要应用于以下领域：

1. 生物医学研究 靶向研究钙信号传导机制、细胞周期调控及基因表达
2. 临床诊断 癌症（乳腺癌/肝癌）、神经退行性疾病（阿尔茨海默病/帕金森病）、心血管疾病的生物标志物筛查
3. 药物开发 钙通道阻滞剂、激酶抑制剂类药物的药效评估
4. 农业与环境科学 植物抗逆性研究、重金属污染生物监测（镉/铅离子结合能力分析）

检测项目

检测仪器

1. 定量分析系统

   • 酶联免疫检测系统（ELISA，检测限0.1 ng/mL）
   • 化学发光成像仪（Western blot定量）
   • 实时荧光定量PCR仪（基因表达分析）

2. 结构功能分析平台

   • 圆二色光谱仪（二级结构分析）
   • 等温滴定量热仪（ITC，结合热力学参数测定）
   • 原子力显微镜（AFM，纳米级构象变化观测）

3. 高通量检测设备

   • 生物分子相互作用分析系统（Biacore T200）
   • 微流控芯片检测平台（样本消耗量＜5μL）

检测方法

1. 免疫检测法 ▷ 双抗体夹心ELISA：包被抗CaM单克隆抗体（克隆号6D4），HRP标记二抗显色 ▷ 荧光免疫层析：量子点标记纳米探针，检测灵敏度提升至5 pg/mL

2. 光谱分析法 • 紫外差示扫描：监测Ca²⁺结合引起的280 nm吸光度变化 • 荧光共振能量转移（FRET）：采用C端/Y138突变体荧光标记探针

3. 分子互作检测 → 表面等离子体共振（SPR）：固定化钙调蛋白，流速30 μL/min，测定PDE1酶结合动力学 → 微量热泳动（MST）：20% LED功率，40% MST功率，检测配体结合引起的迁移率变化

4. 质谱联用技术 ▲ MALDI-TOF/TOF：磷酸化位点定位（误差＜50 ppm） ▲ LC-MS/MS：检测修饰位点占比（柱温35℃，流动相0.1%甲酸）

注：所有实验均参照ISO 15189标准建立质控体系，包括标准品梯度（0.5-200 ng/mL）及阳性质控品（重组人CaM，纯度＞95%）验证。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。