内源激素检测范围 内源激素检测主要针对生物体内天然产生的激素进行定性及定量分析，涵盖植物、动物及微生物等不同生物体系。常见检测样本包括植物组织（如叶片、茎、根、果实）、动物体液（血液、尿液、唾液）、细胞培养物以及微生物发酵产物。检测范围涉及生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯等植物激素，以及胰岛素、甲状腺激素、肾上腺素、性激素等动物激素。
内源激素检测项目 检测项目根据生物类别和激素功能分为以下几类：
- 植物激素：吲哚乙酸（IAA）、赤霉酸（GA3）、玉米素（ZR）、脱落酸（ABA）、乙烯（ETH）等。
- 动物激素：皮质醇、睾酮、雌二醇、促甲状腺激素（TSH）、生长激素（GH）、褪黑素等。
- 微生物相关激素：如部分真菌产生的赤霉素类似物或植物生长调节物质。 检测涵盖激素浓度、代谢产物、激素动态变化（如昼夜节律或发育阶段差异）等指标。
内源激素检测仪器
- 高效液相色谱-质谱联用仪（HPLC-MS）：用于高灵敏度、高特异性的激素定量分析，尤其适用于复杂样本中的痕量激素检测。
- 酶联免疫吸附测定仪（ELISA）：基于抗原-抗体反应，适合批量样本中单一激素的快速筛查。
- 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：适用于挥发性激素（如乙烯）或需衍生化处理的激素分析。
- 荧光分光光度计：检测具有荧光特性的激素或其标记产物。
- 放射性免疫分析仪（RIA）：通过同位素标记实现高精度检测，但受限于放射性安全管理要求。
内源激素检测方法
- 样本前处理：
- 植物组织：液氮研磨后加入预冷提取液（如甲醇/水/甲酸），离心取上清液。
- 动物体液：通过离心去除蛋白质或脂类干扰物，结合固相萃取（SPE）富集目标激素。
- 提取与纯化：
- 采用有机溶剂（乙腈、乙酸乙酯）或缓冲液进行多次萃取，结合C18固相萃取柱去除杂质。
- 衍生化处理（如硅烷化）以提高GC-MS检测灵敏度。
- 仪器分析：
- HPLC-MS参数：反相色谱柱（C18），流动相为甲醇-水梯度洗脱，质谱采用电喷雾电离（ESI）或多反应监测（MRM）模式。
- ELISA步骤：包被抗体→样本孵育→酶标二抗反应→显色读数（450 nm波长）。
- 数据处理：
- 通过标准品建立校准曲线，计算样本激素浓度，结合软件（如MassHunter、GraphPad）进行统计学分析。
- 质量控制：
- 添加内标（如氘代激素）校正提取效率；
- 设置空白对照与重复实验，确保检测结果重复性（RSD＜15%）。
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