抗氧化能力检测范围 抗氧化能力检测主要应用于食品、药品、化妆品、天然产物及生物样本（如血液、组织等）中抗氧化物质的活性评价。具体包括以下领域：

  1. 食品工业：功能性食品、食用油、果蔬、饮料等。
  2. 医药领域：中草药、化学合成药物、保健品等。
  3. 化妆品：抗衰老、防晒及修复类产品。
  4. 科研实验：细胞或动物模型中氧化应激水平的评估。

抗氧化能力检测项目

  1. 自由基清除能力：包括DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基（·OH）及超氧阴离子（O₂⁻）清除率。
  2. 还原能力：铁离子还原能力（FRAP法）和总抗氧化能力（T-AOC）。
  3. 脂质过氧化抑制能力：通过硫代巴比妥酸反应物（TBARS）法评估。
  4. 酶活性检测：超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。
  5. 非酶抗氧化物质含量：维生素C、维生素E、谷胱甘肽（GSH）及多酚类物质定量分析。

抗氧化能力检测仪器

  1. 紫外-可见分光光度计：用于DPPH、ABTS、FRAP等基于吸光度变化的检测。
  2. 荧光分光光度计：适用于ORAC（氧自由基吸收能力）及脂质过氧化产物的荧光标记分析。
  3. 高效液相色谱仪（HPLC）：定量检测维生素、多酚等特定抗氧化成分。
  4. 电子顺磁共振波谱仪（EPR）：直接测定自由基种类及清除效率。
  5. 酶标仪：高通量检测SOD、CAT等酶活性及细胞氧化应激指标。

抗氧化能力检测方法

  1. DPPH法

    • 原理：DPPH自由基在517 nm处吸光度降低与抗氧化能力正相关。
    • 步骤：样品与DPPH乙醇溶液避光反应30分钟，测定吸光度变化，计算清除率。

  2. FRAP法

    • 原理：抗氧化物质将Fe³⁺还原为Fe²⁺，生成蓝色络合物，593 nm处吸光度反映总还原能力。
    • 步骤：样品与FRAP试剂（含TPTZ、FeCl₃、醋酸缓冲液）37℃反应10分钟，测定吸光度。

  3. ABTS法

    • 原理：ABTS⁺自由基在734 nm处吸光度降低与抗氧化能力相关。
    • 步骤：预氧化生成ABTS⁺溶液，加入样品反应6分钟，测定抑制率。

  4. ORAC法

    • 原理：荧光探针（如FITC）在自由基攻击下荧光衰减，样品延缓衰减时间反映抗氧化能力。
    • 步骤：样品与荧光探针、自由基引发剂（AAPH）混合，实时监测荧光强度变化。

  5. HPLC定量法

    • 原理：色谱分离结合标准品比对，定量维生素、多酚等成分。
    • 步骤：样品经提取、过滤后进样，采用C18色谱柱，流动相为甲醇-水体系，紫外或荧光检测器分析。

  6. 生物样本预处理

    • 血液/组织匀浆：离心去除蛋白，低温保存，避免反复冻融。
    • 细胞样本：裂解后测定SOD、GSH等酶活性及MDA（丙二醛）含量。

分享