抗感染活性检测

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检测范围 抗感染活性检测主要针对具有潜在抗菌、抗病毒、抗真菌或抗寄生虫活性的物质，包括天然产物（如植物提取物、微生物代谢物）、合成化合物、抗生素及其衍生物等。检测对象涵盖革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌）、革兰氏阴性菌（如大肠杆菌）、真菌（如白色念珠菌）、病毒（如流感病毒、疱疹病毒）以及寄生虫（如疟原虫）。此外，针对耐药菌株（如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，MRSA）的活性检测也被纳入研究范围。

检测项目

1. 最小抑菌浓度（MIC）：抑制微生物可见生长的最低药物浓度。
2. 最小杀菌浓度（MBC/MFC）：杀灭99.9%微生物的最低药物浓度（针对细菌为MBC，真菌为MFC）。
3. 抑菌圈直径：通过琼脂扩散法测定药物对微生物的抑制范围。
4. 时间-杀菌曲线：动态监测药物在不同浓度下对微生物的杀灭速率。
5. 抗生物膜活性：评估药物对微生物生物膜形成或已形成生物膜的破坏能力。
6. 协同效应分析：检测药物与其他抗菌剂的联合作用效果（如棋盘稀释法）。
7. 耐药基因表达分析：通过分子生物学方法检测药物对耐药基因的调控作用。

检测仪器

1. 酶标仪：用于MIC、MBC/MFC的吸光度测定及细胞活性分析。
2. 自动菌液分配系统：实现高通量微生物接种与药物梯度稀释。
3. PCR仪及实时荧光定量PCR系统：分析耐药基因表达水平及微生物代谢相关基因。
4. 流式细胞仪：检测药物对微生物细胞膜完整性、凋亡及周期的影响。
5. 生物膜分析系统：结合结晶紫染色或激光共聚焦显微镜评估生物膜活性。
6. 琼脂自动打孔器：用于抑菌圈试验的标准化操作。

检测方法

1. 微量肉汤稀释法（CLSI标准）：将待测药物进行2倍梯度稀释，接种标准菌悬液（1×10⁵ CFU/mL），37℃孵育16-20小时后读取MIC值；取无菌生长孔菌液转种琼脂平板，测定MBC/MFC。
2. 琼脂扩散法（Kirby-Bauer法）：将菌液均匀涂布于琼脂平板，放置含药滤纸片或牛津杯，孵育后测量抑菌圈直径，结果参照CLSI标准判读敏感性。
3. 时间-杀菌曲线实验：在特定时间点（0、2、4、8、24小时）取样，通过平板菌落计数法绘制杀菌动力学曲线。
4. 生物膜定量分析：采用96孔板静态培养法形成生物膜，结晶紫染色后测量OD570nm值，或利用荧光染料（如SYTO9/PI）结合共聚焦显微镜观察生物膜结构。
5. 协同效应检测（棋盘法）：将两种药物分别进行梯度稀释，交叉组合后测定FIC指数（FICI≤0.5为协同作用）。
6. 分子检测：提取微生物RNA，通过qRT-PCR分析耐药基因（如mecA、blaNDM-1）的表达变化；流式细胞术检测药物作用后微生物的膜电位及活性氧水平。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。