裸鼠成瘤细胞检测

(CMA)     (ISO) (高新技术企业)

裸鼠成瘤细胞检测内容

一、检测范围

裸鼠成瘤细胞检测主要针对人源肿瘤细胞系或患者来源的异种移植（PDX）模型，通过皮下、原位或转移性接种方式构建肿瘤模型。检测对象为无胸腺裸鼠（BALB/c或NOD/SCID品系），实验周期通常为3-8周，涵盖肿瘤生长、侵袭、转移及药物干预效果评估。

二、检测项目

1. 肿瘤生长动力学：记录接种后肿瘤体积、重量变化及生长曲线。
2. 组织病理学分析：通过HE染色观察肿瘤组织形态、坏死区域及基质浸润程度。
3. 分子标志物检测：评估增殖标志物（Ki-67）、凋亡相关蛋白（Caspase-3）、血管生成标志物（CD31）及转移相关分子（MMP-9）的表达水平。
4. 活体成像监测：利用荧光或生物发光标记技术追踪肿瘤细胞在体内的动态分布。
5. 药物敏感性测试：分析化疗药物、靶向药物或免疫治疗对肿瘤生长的抑制效果。

三、检测仪器

1. 小动物活体成像系统（如IVIS Lumina）：用于实时监测肿瘤细胞的生物发光或荧光信号。
2. 显微CT或超声成像仪：获取肿瘤三维结构及内部血管分布信息。
3. 流式细胞仪：分析肿瘤微环境中免疫细胞比例及细胞周期、凋亡情况。
4. 组织切片扫描仪（如Leica Aperio）：数字化处理HE及免疫组化染色切片。
5. 实时荧光定量PCR仪：检测肿瘤相关基因的mRNA表达水平。

四、检测方法

1. 细胞接种：

   • 选取对数生长期的肿瘤细胞，调整密度至1×10^6~1×10^7 cells/mL，与基质胶（Matrigel）按1:1混合。
   • 在裸鼠右侧腋下或背部皮下注射100-200 μL细胞悬液，记录接种日期及初始坐标。

2. 肿瘤生长监测：

   • 每隔2-3天使用游标卡尺测量肿瘤长径（L）和短径（W），按公式V=0.5×L×W²计算体积。
   • 当肿瘤体积达1000 mm³或动物出现明显消瘦时，终止实验并解剖获取瘤体称重。

3. 样本处理与分析：

   • 肿瘤组织分为三部分：4%多聚甲醛固定后石蜡包埋（用于HE和免疫组化）、液氮速冻保存（用于蛋白质/RNA提取）、新鲜组织消化为单细胞悬液（用于流式检测）。
   • 免疫组化采用SP法染色，一抗孵育条件为4℃过夜，DAB显色后显微镜下评分。

4. 数据统计：

   • 使用GraphPad Prism软件分析肿瘤生长曲线（重复测量方差分析）及组间差异（t检验或ANOVA），以P<0.05为显著性标准。

（注：以上内容为标准化实验流程，具体参数需根据研究目的调整。）

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。