内毒素检测

(CMA)     (ISO) (高新技术企业)

内毒素检测范围 内毒素检测主要应用于医药、医疗器械、生物制品及相关领域，具体包括：

1. 注射剂、疫苗、血液制品等药品的成品及中间体。
2. 植入性医疗器械（如心脏支架、人工关节）及体外诊断试剂。
3. 制药用水（纯化水、注射用水）及生产环境中的内毒素污染监控。
4. 原料药、辅料及包装材料的质量控制。

内毒素检测项目

1. 定性检测：通过凝胶法判断样品中内毒素是否超出限值。
2. 定量检测：采用动态显色法或浊度法测定内毒素的具体浓度（EU/mL或EU/mg）。
3. 干扰试验：验证样品基质是否影响检测结果的准确性。
4. 样品前处理：针对高蛋白、高黏度或含抑菌成分的样品进行稀释、加热或调节pH值。

内毒素检测仪器

1. 鲎试剂（LAL试剂）：核心生物试剂，基于鲎血细胞裂解物与内毒素的特异性反应。
2. 分光光度计：用于动态浊度法或显色法的吸光度测定，实现内毒素浓度计算。
3. 恒温水浴箱或干式恒温器：维持37℃±1℃的反应温度，确保检测条件稳定。
4. 无热原离心机及微量移液器：用于样品前处理及试剂分装，避免交叉污染。
5. pH计：调节样品pH至6.0-8.0，消除酸碱度对鲎试剂的干扰。

内毒素检测方法

1. 凝胶法（Gel-Clot）

   • 原理：内毒素与鲎试剂反应形成凝胶，通过倒管观察是否凝固。
   • 步骤：将样品与鲎试剂混合，37℃孵育60分钟，阳性结果呈现固态凝胶。

2. 动态浊度法（Kinetic Turbidimetric Assay）

   • 原理：内毒素引发鲎试剂中酶促反应，溶液浊度随时间增加，通过检测浊度变化速率计算浓度。
   • 步骤：使用分光光度计连续监测吸光度（340nm），软件拟合反应曲线并输出结果。

3. 动态显色法（Kinetic Chromogenic Assay）

   • 原理：内毒素激活鲎试剂中的显色底物（如Boc-Leu-Gly-Arg-pNA），释放黄色产物，检测405nm吸光度变化。
   • 步骤：记录反应时间至预设吸光度阈值，根据标准曲线换算内毒素浓度。

4. 终点显色法（Endpoint Chromogenic Assay）

   • 原理：反应终止后加入显色剂，通过比色法测定内毒素浓度。
   • 步骤：样品与鲎试剂孵育后加入终止液及显色剂，测量吸光度并与标准曲线对比。

注意事项

• 所有操作需在无热原环境下进行，实验器具需经250℃以上高温干热除内毒素。
• 需定期验证标准内毒素对照品的效价及试剂灵敏度。
• 检测限需符合药典规定（如中国药典要求注射剂内毒素限值为0.25 EU/mL以下）。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。