高脂血症动物模型检测

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检测范围

高脂血症动物模型的检测范围主要涵盖以下方面：

1. 动物种类：常用小鼠（如C57BL/6、ApoE-/-）、大鼠（SD、Wistar）、仓鼠、新西兰白兔、小型猪及非人灵长类动物（如食蟹猴）。
2. 造模方法：
   • 高脂饲料诱导（脂肪含量40-60%，含胆固醇1-5%、胆酸盐0.1-0.5%）；
   • 基因编辑（如LDLR-/-、ApoE-/-小鼠）；
   • 药物诱导（如腹腔注射P-407或链脲佐菌素STZ联合高脂饮食）。
3. 检测阶段：造模周期（4-16周），重点关注血脂异常、肝脏脂肪变性、动脉粥样硬化斑块形成等病理过程。

检测项目

1. 血液生化指标：
   • 血脂四项：总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；
   • 载脂蛋白（ApoB、ApoA1）、游离脂肪酸（FFA）、氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）。
2. 组织病理学分析：
   • 肝脏：油红O染色（脂质沉积）、HE染色（脂肪变性程度）；
   • 动脉：苏丹IV染色（斑块脂质）、Masson染色（胶原纤维）；
   • 脂肪组织：HE染色（脂肪细胞肥大、炎症浸润）。
3. 基因与蛋白表达：
   • 脂代谢相关基因（SREBP-1c、LDLR、PPARα）及蛋白（如FASN、CPT1A）；
   • 炎症因子（TNF-α、IL-6）及氧化应激标志物（SOD、MDA）。
4. 代谢组学：血浆或组织中脂肪酸、甘油磷脂、胆汁酸等代谢物谱分析。

检测仪器

1. 血液检测：
   • 全自动生化分析仪（如Hitachi 7020、Beckman AU5800）；
   • 酶标仪（ELISA检测，如BioTek Synergy H1）。
2. 组织病理学：
   • 冰冻切片机（Leica CM1950）、石蜡切片机（Thermo Scientific HM325）；
   • 光学显微镜（Olympus BX53）及成像系统（Nikon DS-Ri2）。
3. 分子生物学检测：
   • 实时荧光定量PCR仪（Bio-Rad CFX96）；
   • Western blot系统（电泳仪、转膜仪、化学发光成像仪，如Tanon 5200）。
4. 代谢组学：
   • 液相色谱-质谱联用仪（LC-MS，如Agilent 6545 Q-TOF）；
   • 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS，如Thermo Scientific ISQ 7000）。

检测方法

1. 血液样本处理：
   • 禁食12小时后采集尾静脉或心脏血，离心（3000 rpm，15 min）分离血清/血浆；
   • 全自动生化分析仪检测TC、TG等，试剂盒参照国际标准（如CHOD-PAP法测TC，GPO-PAP法测TG）。
2. ELISA检测：
   • 按试剂盒（如Elabscience、R&D Systems）操作，标准曲线法计算ApoB、Ox-LDL浓度。
3. 组织病理学染色：
   • 油红O染色：冰冻切片固定后，油红O工作液浸染10 min，苏木素复染细胞核；
   • HE染色：石蜡切片脱蜡后，苏木素-伊红染色，观察脂肪空泡及炎症细胞。
4. qPCR与Western blot：
   • RNA提取（TRIzol法），反转录为cDNA，SYBR Green法扩增目标基因；
   • 蛋白提取（RIPA裂解液），SDS-PAGE电泳，转膜后一抗（如抗-SREBP1，1:1000）孵育，化学发光法显影。
5. 代谢组学分析：
   • 血浆样本经乙腈沉淀蛋白，LC-MS正/负离子模式扫描，原始数据经XCMS软件进行峰提取、归一化及差异代谢物筛选。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。