肥胖动物模型检测

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检测范围 肥胖动物模型的检测范围涵盖常用实验动物（如小鼠、大鼠）及其生理、代谢、分子层面的表型特征。动物模型通常通过高脂饮食诱导、基因编辑（如ob/ob、db/db小鼠）或化学干预（如谷氨酸钠诱导）建立，检测周期为造模后4-24周。检测对象包括体重、体成分、血液生化指标、脂肪组织病理学及代谢相关基因/蛋白表达等。

检测项目

1. 生理指标
   • 基础指标：体重、体长（计算Lee’s指数）、内脏/皮下脂肪重量及脂肪体重比。
   • 代谢参数：食物摄入量、能量消耗（间接测热法）、活动量（转轮实验）。
2. 生化指标
   • 血脂四项（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、空腹血糖（FBG）、胰岛素（FINS）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。
   • 炎症因子：TNF-α、IL-6、IL-1β（ELISA检测）。
3. 组织学指标
   • 脂肪组织HE染色（观察脂肪细胞肥大/增生）。
   • 肝脏油红O染色（评估脂质沉积）。
   • 脂肪细胞直径/面积定量分析（图像分析软件）。
4. 分子生物学指标
   • 代谢相关基因表达：Leptin、Adiponectin、PPARγ、UCP1（实时荧光定量PCR）。
   • 蛋白水平检测：AMPK、p-AMPK、AKT、p-AKT（Western blot）。

检测仪器

1. 体重秤（精度0.1g）、体成分分析仪（核磁共振/MRI）。
2. 代谢笼系统（Columbus Instruments）监测摄食量、饮水量及气体交换。
3. 全自动生化分析仪（如Hitachi 7020）检测血脂、血糖。
4. 酶标仪（BioTek Synergy H1）用于ELISA分析。
5. 显微成像系统（Leica DMi8）配合图像分析软件（ImageJ/Image-Pro Plus）。
6. 实时荧光定量PCR仪（ABI QuantStudio 5）、垂直电泳系统（Bio-Rad）。

检测方法

1. 体重与体脂比测定

   • 每周固定时间称量空腹体重，持续8-12周。
   • 处死后分离内脏（肾周、附睾）及皮下脂肪，称重计算脂肪体重比（脂肪重量/体重×100%）。

2. 血液生化检测

   • 尾静脉采血或心脏取血，3000 rpm离心15分钟分离血清。
   • 全自动生化分析仪检测TC、TG、LDL-C、HDL-C，葡萄糖氧化酶法测FBG。

3. 组织病理学分析

   • 脂肪/肝脏组织4%多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋切片（厚度5μm）。
   • HE染色：苏木精染色5分钟，伊红染色2分钟，中性树胶封片。
   • 油红O染色：冰冻切片（8μm），油红O工作液孵育15分钟，苏木素复染细胞核。

4. 分子生物学实验

   • RNA提取：TRIzol法提取脂肪组织RNA，NanoDrop测定浓度与纯度。
   • qPCR：SYBR Green法，引物退火温度58-62℃，40个循环，2−ΔΔ��−ΔΔCt法计算基因相对表达量。
   • Western blot：RIPA裂解液提取蛋白，BCA法定量，SDS-PAGE电泳后转膜，5%脱脂牛奶封闭，一抗4℃孵育过夜（稀释比1:1000），ECL显影。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。