自发性肿瘤小鼠模型检测

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检测范围

本研究基于自发性肿瘤小鼠模型（如BALB/c或C3H/HeJ品系），重点检测以下范围：

1. 肿瘤发生情况：记录小鼠自发性肿瘤的发生率、潜伏期及生长速率。
2. 肿瘤类型：区分实体瘤（如乳腺瘤、淋巴瘤）与血液系统肿瘤。
3. 组织病理学特征：分析肿瘤组织形态、分化程度及侵袭性。
4. 分子生物学指标：检测与肿瘤发生相关的基因突变、蛋白表达及信号通路活性。
5. 样本数量：每组包含20只小鼠，雌雄各半，持续观察至自然死亡或实验终点（12个月）。

检测项目

1. 肿瘤体积与重量：通过游标卡尺测量肿瘤长径（L）和短径（W），按公式 �=�×�22V=2L×W2​ 计算体积；解剖后称量瘤体湿重。
2. 组织病理学分析：
   • 石蜡包埋肿瘤组织，切片后行HE染色，观察细胞异型性、核分裂象及坏死区域。
   • 免疫组化（IHC）检测Ki-67（增殖指数）、p53（突变蛋白）及Bcl-2（凋亡抑制蛋白）表达。
3. 分子生物学检测：
   • qPCR或Western Blot定量肿瘤组织中EGFR、RAS、PI3K/AKT通路相关基因的mRNA或蛋白水平。
   • ELISA检测血清中IL-6、TNF-α等炎症因子浓度。
4. 血液学指标：全自动血细胞分析仪测定白细胞计数、血红蛋白及血小板水平。
5. 代谢功能评估：通过小动物活体成像系统（IVIS）监测肿瘤代谢活性（如荧光标记葡萄糖类似物摄取）。

检测仪器

1. 肿瘤体积测量：电子游标卡尺（精度0.01 mm）。
2. 组织处理：全自动脱水机、石蜡包埋机、切片机（厚度4 μm）。
3. 显微成像：光学显微镜（400×分辨率）及数字病理扫描仪。
4. 分子检测：实时荧光定量PCR仪、蛋白电泳系统、化学发光成像仪。
5. 血液分析：全自动血细胞分析仪（型号：Sysmex XN-1000）。
6. 活体成像：小动物活体成像系统（PerkinElmer IVIS Spectrum）。

检测方法

1. 肿瘤生长监测：
   • 每周2次触诊记录肿瘤出现时间；游标卡尺测量瘤体尺寸，持续至肿瘤直径达1.5 cm或小鼠出现濒死状态。
2. 组织样本处理：
   • 处死小鼠后迅速分离肿瘤组织，4%多聚甲醛固定24小时，梯度乙醇脱水后石蜡包埋。
   • HE染色流程：苏木精染色5分钟，伊红复染2分钟，中性树胶封片。
3. 免疫组化（IHC）：
   • 抗原修复采用柠檬酸钠缓冲液（pH 6.0）高压修复法；一抗孵育（Ki-67 1:200，4℃过夜），DAB显色后苏木精复染。
4. qPCR实验：
   • 提取肿瘤组织总RNA，逆转录为cDNA；SYBR Green法扩增目标基因，以GAPDH为内参，采用2−ΔΔCt法计算相对表达量。
5. 数据统计：
   • 使用SPSS 26.0软件进行t检验或单因素方差分析（ANOVA），P<0.05为差异显著。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。