微生物量碳氮检测

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微生物量碳氮检测技术规范

一、检测范围 微生物量碳氮检测主要适用于以下环境样本：

1. 土壤样品（包括农业土壤、森林土壤、湿地土壤等）；
2. 水体及沉积物（如河流、湖泊、海洋沉积物）；
3. 生物处理系统（如废水处理厂活性污泥、堆肥物料）；
4. 植物与动物组织（用于研究共生微生物碳氮代谢）。

二、检测项目

1. 微生物量碳（Microbial Biomass Carbon, MBC）：反映微生物群落总碳含量；
2. 微生物量氮（Microbial Biomass Nitrogen, MBN）：表征微生物群落总氮含量；
3. 微生物量碳氮比（MBC/MBN）：评估微生物群落代谢活性及营养限制状态；
4. 可溶性有机碳（DOC）与可溶性有机氮（DON）：测定微生物可利用的碳氮资源；
5. 微生物呼吸速率：间接反映微生物碳代谢强度。

三、检测仪器

1. 总有机碳分析仪（TOC Analyzer）：用于测定样品中总有机碳含量；
2. 元素分析仪（Elemental Analyzer）：检测总氮、总碳含量；
3. 熏蒸提取装置：用于微生物量碳氮的前处理（如氯仿熏蒸）；
4. 离心机：分离提取液与固体残渣；
5. 分光光度计：比色法测定铵态氮、硝态氮浓度；
6. pH计与电导仪：监测提取液理化性质；
7. 恒温培养箱：控制微生物呼吸实验条件。

四、检测方法

1. 微生物量碳（MBC）测定

   • 熏蒸提取-K₂SO₄浸提法： （1）样品分为熏蒸组（氯仿熏蒸24小时）与未熏蒸组； （2）使用0.5 mol/L K₂SO₄溶液振荡提取30分钟； （3）离心后取上清液，经TOC分析仪测定可溶性有机碳含量； （4）MBC =（熏蒸组TOC - 未熏蒸组TOC）/ 转换系数（通常取0.45）。

2. 微生物量氮（MBN）测定

   • 熏蒸提取-KCl浸提法： （1）同MBC步骤进行氯仿熏蒸； （2）使用2 mol/L KCl溶液提取，离心后取上清液； （3）通过比色法或元素分析仪测定总氮含量； （4）MBN =（熏蒸组TN - 未熏蒸组TN）/ 转换系数（通常取0.54）。

3. 可溶性有机碳氮（DOC/DON）测定

   • 未熏蒸样品经0.45 μm滤膜过滤后，直接使用TOC分析仪与元素分析仪测定。

4. 微生物呼吸速率测定

   • 碱液吸收法： （1）样品置于密闭培养装置中，底部放置NaOH吸收CO₂； （2）恒温培养后，滴定剩余NaOH计算CO₂释放量； （3）呼吸速率以单位时间内CO₂生成量表示。

5. 质量控制

   • 平行样检测误差需＜10%；
   • 空白对照消除试剂干扰；
   • 标准物质（如葡萄糖-硫酸铵溶液）验证仪器精度。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。