精浆弹性蛋白酶定量检测

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检测范围 精浆弹性蛋白酶定量检测主要应用于男性生殖系统炎症性疾病的辅助诊断与疗效评估，包括急慢性前列腺炎、附睾炎、精囊炎等。该检测适用于存在生殖道感染症状（如尿痛、会阴部胀痛、精液异常）的男性患者，或需评估抗生素治疗效果的人群。参考值范围通常划分为：正常（<300 μg/L）、轻度升高（300-600 μg/L）、显著升高（>600 μg/L），具体需结合临床实验室标准。

检测项目 检测项目为精浆中弹性蛋白酶-1（E1）的浓度测定，通过定量分析其含量反映中性粒细胞介导的生殖道炎症程度。检测结果以单位体积浓度（μg/L）表示，部分实验室可能联合其他炎症标志物（如C反应蛋白、白细胞计数）进行综合判读。

检测仪器

1. 酶标仪：用于酶联免疫吸附试验（ELISA）的吸光度测定，波长通常选择450 nm。
2. 离心机：处理精液样本，分离精浆，推荐转速3000 rpm，持续10分钟。
3. 恒温孵育箱：控制反应温度（37℃±1℃），确保抗原-抗体结合稳定性。
4. 微量加样器：精确移取样本及试剂，量程覆盖1-1000 μL。
5. 洗板机：ELISA操作中清洗微孔板，减少非特异性结合干扰。

检测方法

1. 样本采集与处理：

   • 受检者禁欲2-7天，通过手淫法采集全份精液至无菌容器，37℃液化30分钟。
   • 3000 rpm离心10分钟，分离上层精浆，-20℃保存待检，避免反复冻融。

2. 试剂准备：

   • 采用商品化ELISA试剂盒，包含预包被抗弹性蛋白酶抗体、酶标二抗、显色底物（TMB）及终止液。
   • 标准品梯度稀释（0-1000 μg/L），建立标准曲线。

3. 检测步骤：

   • 加样：标准品及待测精浆各加100 μL至微孔，设双复孔，37℃孵育60分钟。
   • 洗涤：洗板机以PBS-T缓冲液清洗5次，去除未结合物质。
   • 酶标二抗孵育：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体，37℃反应30分钟。
   • 显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，硫酸终止反应。
   • 读数：酶标仪测定450 nm吸光度值，通过标准曲线计算精浆弹性蛋白酶浓度。

4. 质量控制：

   • 每批次检测包含空白孔、质控品（低、中、高浓度），批内变异系数（CV）需<10%。
   • 结果异常时复测或采用化学发光法验证。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。