稀释法药敏检测

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稀释法药敏检测范围 稀释法药敏检测适用于临床分离的病原微生物（如细菌、真菌等）对各类抗菌药物敏感性的定量评估。检测对象涵盖革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌、链球菌）、革兰氏阴性菌（如大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）、酵母样真菌（如念珠菌属）及其他需氧微生物。该方法主要用于指导临床合理用药，评估药物最低抑菌浓度（MIC），明确耐药性特征。

稀释法药敏检测项目

1. 抗菌药物敏感性测定：包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类、糖肽类等抗生素的MIC值测定。
2. 抗真菌药物敏感性测定：针对唑类（如氟康唑）、棘白菌素类（如卡泊芬净）、多烯类（如两性霉素B）等药物的MIC测定。
3. 联合药敏试验：评估两种及以上药物联合应用时的协同或拮抗效应。
4. 耐药机制筛查：通过MIC异常值推测可能的耐药机制（如ESBLs产生、外排泵高表达等）。

稀释法药敏检测仪器

1. 微量稀释板：预置梯度浓度抗菌药物的96孔板，用于肉汤微量稀释法。
2. 自动化接种仪：精确分配菌悬液至检测板孔，确保接种量均一性。
3. 全自动微生物药敏分析系统：整合孵育、读数及结果判读功能（如VITEK 2、Phoenix系统）。
4. 比浊仪：校准菌液浓度至0.5麦氏单位（约1×10^8 CFU/mL）。
5. 恒温培养箱：维持35±2℃培养环境，支持需氧或特定气体条件培养。

稀释法药敏检测方法

1. 肉汤稀释法

   • 步骤：
     • 制备系列倍比稀释的抗菌药物溶液（浓度涵盖临床折点范围）。
     • 接种标准化的菌悬液（终浓度约5×10^5 CFU/mL）至含药孔及生长对照孔。
     • 35℃孵育16-20小时（细菌）或24-48小时（真菌），观察孔内浊度变化。
   • 结果判读：以肉眼或分光光度计检测无可见生长的最低药物浓度为MIC值。

2. 琼脂稀释法

   • 步骤：
     • 将不同浓度抗菌药物加入熔化的琼脂培养基，倾注平板。
     • 使用多点接种器接种菌悬液（约10^4 CFU/点）。
     • 孵育后观察菌落生长抑制情况。
   • 结果判读：以完全抑制菌落形成的最低药物浓度作为MIC值。

3. 质量控制：

   • 同步测试标准质控菌株（如ATCC 25922大肠埃希菌、ATCC 29213金黄色葡萄球菌）。
   • 确保药物浓度梯度准确性、培养基pH值（7.2-7.4）及离子浓度符合CLSI或EUCAST指南要求。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。