蛋白质合成抑制剂效应检测

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信息概要

蛋白质合成抑制剂效应检测是针对能够阻断或干扰生物体内蛋白质合成过程的化合物或物质进行评估的分析服务。该类检测主要应用于药物研发、微生物学、毒理学及农业化学领域，用于筛选和验证具有抑制翻译机制活性的分子。检测的重要性在于明确抑制剂的作用靶点、效力及选择性，为抗生素开发、抗肿瘤药物优化及生物农药设计提供关键数据支撑，同时评估潜在毒副作用。概括而言，该检测通过量化抑制剂对核糖体功能、氨基酸转运或延伸因子等环节的影响，确保其在医疗或工业应用中的有效性与安全性。

检测项目

抑制率测定, IC50值计算, 最小抑制浓度(MIC), 时间-杀伤曲线分析, 核糖体结合亲和力, 翻译起始干扰评估, 肽键形成抑制, 延伸因子EF-Tu/G活性检测, 终止密码子通读率, mRNA解码效率, 抗生素耐药性交叉测试, 细胞毒性评估, 选择性指数(SI)测定, 代谢稳定性, 膜通透性分析, 细菌生长曲线监测, 真核与原核系统比对, 体外翻译系统活性, 体内模型验证, 基因表达谱变化

检测范围

氨基糖苷类抑制剂, 四环素类化合物, 大环内酯类抗生素, 氯霉素及其衍生物, 林可酰胺类, 噁唑烷酮类, 链阳菌素, 夫西地酸, 莫匹罗星, 利奈唑胺, 替加环素, 奎奴普丁-达福普汀, 光谱抗生素, 天然植物提取物, 合成小分子库, 多肽类抑制剂, 核酸适配体, 纳米材料, 临床分离菌株, 工程改造核糖体

检测方法

体外无细胞翻译系统法：使用兔网织红细胞或大肠杆菌提取物模拟蛋白质合成过程。

放射性同位素标记法：通过³H-亮氨酸或³⁵S-甲硫氨酸掺入量量化抑制效果。

荧光共振能量转移(FRET)：标记核糖体亚基实时监测构象变化。

表面等离子共振(SPR)：分析抑制剂与核糖体RNA的结合动力学。

高效液相色谱(HPLC)：分离并定量翻译产物中的多肽片段。

酶联免疫吸附测定(ELISA)：检测特定蛋白合成量的变化。

微流体芯片技术：高通量筛选大量抑制剂样本。

等温滴定量热法(ITC)：测量结合过程中的热力学参数。

冷冻电镜(cryo-EM)：解析抑制剂-核糖体复合物的三维结构。

流式细胞术：评估单细胞水平的蛋白质合成抑制。

报告基因检测法：利用荧光素酶或GFP表达系统量化抑制。

核糖体图谱分析：通过mRNA测序追踪翻译停滞位点。

微量热泳动(MST)：检测分子相互作用引起的迁移率变化。

圆二色谱(CD)：分析抑制剂诱导的RNA二级结构改变。

细菌生长抑制圈法：通过琼脂扩散实验初步筛选活性。

检测仪器

微孔板读数器, 液相色谱-质谱联用仪, 荧光显微镜, 等温量热仪, 表面等离子共振仪, 流式细胞仪, 冷冻电镜, 实时PCR仪, 紫外分光光度计, 高效液相色谱系统, 微量热泳动仪, 圆二色谱仪, 闪烁计数器, 自动化液体处理系统, 生物分子相互作用分析系统

问：蛋白质合成抑制剂效应检测常用于哪些疾病治疗领域？ 答：主要应用于抗生素研发（如结核病、败血症）、抗肿瘤药物开发（靶向癌细胞快速增殖）及抗寄生虫药物筛选。

问：检测中如何区分特异性与非特异性抑制剂？ 答：通过比对真核与原核翻译系统活性、测定选择性指数，并结合结构生物学方法验证靶点结合位点。

问：高通量筛选在抑制剂检测中有何优势？ 答：可并行测试数千种化合物，快速识别先导分子，并整合自动化仪器提升数据可靠性与筛选效率。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。