信号通路激活状态测试

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信息概要

信号通路激活状态测试是针对细胞信号转导通路中关键分子（如激酶、受体或转录因子）的活性水平进行的检测项目。信号通路是细胞对外界刺激（如激素、生长因子或应激）产生响应的核心机制，涉及复杂的磷酸化、蛋白互作和基因表达调控过程。此类测试的重要性在于：它可揭示疾病（如癌症、自身免疫病）的分子机制，评估药物靶向治疗效果，指导个性化医疗，并确保细胞模型或生物样本的功能性验证。检测信息通常涵盖磷酸化状态、蛋白表达量、酶活性及下游效应分子变化，通过高通量技术实现精准定量。

检测项目

磷酸化水平检测，蛋白表达量分析，激酶活性测定，受体二聚化状态，转录因子核转位，第二信使浓度（如cAMP、Ca2+），MAPK通路激活，PI3K/AKT通路活性，JAK/STAT信号强度，Wnt/β-catenin通路状态，NF-κB核定位，细胞凋亡信号检测，自噬通路标记物，细胞周期蛋白活性，GPCR偶联效应，TGF-β信号转导，Hedgehog通路活性，Notch通路切割状态，ROS相关信号，DNA损伤响应通路

检测范围

MAPK信号通路，PI3K/AKT信号通路，JAK/STAT信号通路，Wnt信号通路，NF-κB信号通路，TGF-β信号通路，Hedgehog信号通路，Notch信号通路，GPCR介导通路，细胞凋亡通路，自噬信号通路，细胞周期调控通路，DNA损伤修复通路，氧化应激通路，胰岛素信号通路，钙信号通路，cAMP/PKA通路，TLR/免疫信号通路，生长因子受体通路，激素信号通路

检测方法

Western Blotting：通过抗体检测特定蛋白的磷酸化或总蛋白水平，半定量分析通路激活。

ELISA：利用酶联免疫吸附测定法高灵敏度定量信号分子浓度。

流式细胞术：单细胞水平检测磷酸化蛋白，适用于异质性样本。

免疫荧光显微镜：可视化信号分子亚细胞定位（如核转位）。

质谱分析：高通量鉴定磷酸化位点及蛋白互作网络。

报告基因 assay：通过荧光或发光信号测量转录因子活性。

激酶活性检测：使用底物肽段和ATP类似物直接测定激酶功能。

蛋白质芯片：并行分析多条通路中多个靶点的表达。

qPCR：检测下游靶基因表达变化，间接反映通路激活。

FRET：荧光共振能量转移技术实时监测蛋白互作动态。

细胞热转移 assay：评估小分子与通路蛋白的结合活性。

磷酸化流式细胞术：结合流式与磷酸化抗体进行多参数分析。

微流控芯片：整合多种检测于微型平台，提高通量。

表面等离子共振：实时量化生物分子相互作用动力学。

纳米孔测序：新兴技术用于检测信号通路相关的表观遗传变化。

检测仪器

酶标仪，流式细胞仪，荧光显微镜，Western Blot成像系统，质谱仪，实时PCR仪，蛋白质芯片扫描仪，FRET检测系统，微流控设备，表面等离子共振仪，纳米孔测序仪，离心机，电泳系统，化学发光检测仪，细胞培养箱

问：信号通路激活状态测试在癌症研究中如何应用？答：该测试可识别肿瘤细胞中异常激活的通路（如PI3K/AKT），用于靶向药物筛选、疗效监测及耐药机制分析。

问：为什么需要检测信号通路的磷酸化水平？答：磷酸化是信号转导的关键修饰，直接反映通路瞬时活性，比总蛋白表达更能体现功能状态。

问：此类测试对药物开发有何价值？答：它帮助验证药物靶点特异性，评估化合物对通路抑制或激活效果，加速临床前研究。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。