细胞线粒体13C底物氧化测试

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信息概要

细胞线粒体13C底物氧化测试是一种基于稳定同位素13C标记技术，用于评估细胞中线粒体对特定底物（如葡萄糖、脂肪酸或氨基酸）的氧化代谢能力的检测项目。该测试通过追踪13C标记底物在细胞代谢途径中的转化，定量分析线粒体呼吸链功能、三羧酸循环活性以及能量产生效率。检测的重要性在于它能揭示细胞能量代谢状态，对研究代谢疾病（如糖尿病、癌症）、药物毒理学评估、衰老机制及营养干预效果具有关键意义，为生物医学研究和临床诊断提供精准的代谢动力学数据。

检测项目

底物氧化速率, 13C标记底物利用率, 线粒体呼吸控制率, 三羧酸循环通量, 乙酰辅酶A生成量, 二氧化碳释放率, 氧消耗速率, ATP产率, NADH/NAD+比率, 活性氧水平, 膜电位变化, 酶活性测定, 代谢物中间体浓度, 同位素富集度, 底物特异性氧化, 能量电荷状态, 代谢流分析, 细胞存活率, 线粒体DNA含量, 抗氧化能力

检测范围

肝细胞, 心肌细胞, 神经元, 骨骼肌细胞, 脂肪细胞, 癌细胞, 干细胞, 免疫细胞, 胰岛β细胞, 肾细胞, 肺上皮细胞, 皮肤成纤维细胞, 血细胞, 内皮细胞, 肠上皮细胞, 脑胶质细胞, 生殖细胞, 成骨细胞, 软骨细胞, 唾液腺细胞

检测方法

同位素比率质谱法：通过测量13C/12C比值精确量化底物氧化产物。

气相色谱-质谱联用法：分离和鉴定13C标记的代谢中间体。

液相色谱-质谱联用法：高效分析水溶性13C代谢物。

核磁共振波谱法：非侵入性监测13C标记底物的动态代谢流。

荧光测定法：使用荧光探针实时检测线粒体膜电位变化。

氧消耗测定法：通过氧电极或传感器测量细胞耗氧率。

ATP生物发光法：利用荧光素酶反应定量ATP产量。

酶联免疫吸附试验：检测特定代谢相关蛋白的表达水平。

流式细胞术：分析线粒体质量或活性氧在单细胞水平。

Western blotting：评估线粒体酶蛋白的丰度。

细胞培养与孵育法：在控制条件下进行13C底物处理。

代谢物提取与纯化法：从细胞样本中分离目标代谢物。

同位素示踪动力学建模：利用数学模型模拟代谢通量。

显微镜成像技术：结合荧光标记观察线粒体形态。

比色法：通过吸光度变化测定酶活性或代谢物浓度。

检测仪器

同位素比率质谱仪, 气相色谱-质谱联用仪, 液相色谱-质谱联用仪, 核磁共振谱仪, 荧光显微镜, 氧消耗测定系统, 微孔板读数器, 流式细胞仪, Western blotting系统, 细胞培养箱, 离心机, 纯化色谱系统, 酶标仪, 显微镜成像系统, 样品制备设备

细胞线粒体13C底物氧化测试主要用于哪些疾病研究？该测试常用于代谢性疾病如糖尿病、肥胖症、癌症以及神经退行性疾病的研究，因为它能揭示细胞能量代谢异常。

如何保证13C底物氧化测试的准确性？准确性依赖于严格的实验设计，包括使用高纯度13C标记底物、校准检测仪器、设置阴性对照，并通过重复实验验证数据可靠性。

这种测试在药物开发中有何应用？在药物开发中，该测试可用于评估候选药物对线粒体功能的影响，例如检测药物是否改善或抑制细胞代谢，从而预测疗效或毒性。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。