核酸纯化后样本检测

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信息概要

核酸纯化后样本检测是指对经过提取和纯化处理的核酸（如DNA或RNA）样本进行质量、浓度、纯度及完整性的评估与分析。该检测是分子生物学实验、临床诊断和生物技术应用中的关键步骤，可确保核酸样本适用于下游应用（如PCR、测序、基因表达分析），避免因样本质量问题导致实验失败或结果偏差。检测通常包括定量、定性及污染物筛查，对保证数据准确性和可重复性至关重要。

检测项目

核酸浓度, 核酸纯度（A260/A280）, 核酸纯度（A260/A230）, 核酸完整性, DNA片段大小分布, RNA完整性指数（RIN）, 蛋白质污染, 盐离子残留, 有机溶剂残留, 酶抑制剂检测, 基因组DNA污染（对于RNA样本）, 外源性DNA污染, 内毒素水平, pH值, 吸光度比值偏差, 荧光染料干扰, 核酸降解程度, 微生物污染, 载体RNA回收率, 甲基化状态评估

检测范围

基因组DNA, 质粒DNA, 总RNA, mRNA, miRNA, cDNA, PCR产物, 病毒核酸, 细菌DNA, 真菌RNA, 植物基因组DNA, 动物组织DNA, 血液样本DNA, 尿液核酸, 粪便样本RNA, 环境样本DNA, 法医样本DNA, 细胞培养物核酸, 石蜡包埋组织核酸, 唾液核酸

检测方法

紫外分光光度法：通过测量核酸在260nm处的吸光度来定量和评估纯度。

荧光定量法：使用荧光染料（如PicoGreen）特异性结合核酸，提高检测灵敏度。

琼脂糖凝胶电泳：可视化评估核酸片段大小和完整性。

毛细管电泳：提供高分辨率的核酸大小分析和定量数据。

微流控芯片技术：自动化评估核酸浓度和完整性，适用于高通量样本。

qPCR或数字PCR：检测核酸的功能性及抑制剂存在。

比色法：通过化学反应快速筛查污染物（如蛋白质）。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：特异性检测内毒素或蛋白质污染。

高效液相色谱（HPLC）：分离和定量核酸及杂质。

质谱分析法：用于核酸修饰（如甲基化）的精确鉴定。

下一代测序（NGS）：评估核酸样本的适用性于测序应用。

核糖核酸酶保护试验：专门检测RNA完整性。

生物分析仪系统：集成电泳和荧光检测进行全自动分析。

纳米颗粒跟踪分析：测量核酸颗粒的大小和浓度。

实时荧光监测：动态评估核酸降解过程。

检测仪器

紫外分光光度计, 荧光光度计, 琼脂糖凝胶电泳系统, 毛细管电泳仪, 微流控分析仪, 实时荧光定量PCR仪, 数字PCR系统, 酶标仪, HPLC系统, 质谱仪, 下一代测序仪, 生物分析仪, 纳米颗粒分析仪, 离心机, 核酸定量仪

核酸纯化后样本检测为什么重要？因为它确保核酸质量符合下游实验要求，如PCR或测序，避免假阴性或数据误差。

如何判断核酸纯化后样本是否被污染？可通过检测A260/A280和A260/A230比值、凝胶电泳分析完整性、以及特异性测试（如内毒素检测）来评估。

核酸纯化后样本检测常用哪些快速方法？紫外分光光度法和荧光定量法是最常见的快速方法，适用于大多数实验室的日常质量控制。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。