大肠埃希氏菌O157：H7NM检测

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信息概要

大肠埃希氏菌O157:H7NM检测标准主要依据国际食品微生物标准委员会（ICMSF）及各国食品安全法规制定，现行常用标准包括ISO 16654:2001《食品和动物饲料微生物学 大肠埃希氏菌O157检测方法》。该标准于2001年发布，现行有效，尚未废止。检测涵盖菌株分离、生化鉴定、血清学确认及分子生物学验证等内容，适用于食品、环境样本及临床标本的检测。

检测项目

菌落总数测定，stx1基因检测，stx2基因检测，eaeA基因检测，溶血素活性检测，O157抗原鉴定，H7鞭毛抗原检测，山梨醇发酵试验，β-葡萄糖醛酸酶活性，吲哚试验，甲基红试验，VP试验，柠檬酸盐利用试验，尿素酶试验，耐药性分析（氨苄西林、四环素、磺胺类等），产志贺毒素能力验证，生物被膜形成能力，脉冲场凝胶电泳分型，全基因组测序分析，环境适应性（耐酸性、耐盐性），生长曲线测定。

检测范围

生鲜肉类，乳制品，果蔬制品，即食食品，婴幼儿配方奶粉，瓶装饮用水，发酵食品，冷冻食品，食品加工器械表面拭子，动物饲料，医院环境样本，污水处理厂出水，土壤样本，临床粪便标本，食品包装材料，餐饮器具，肉类加工废水，宠物食品，食品添加剂，药品原料。

检测方法

免疫磁珠分离法（IMS）：利用抗体包被磁珠特异性捕获目标菌。

PCR检测法：通过特异性引物扩增stx1、stx2等毒力基因。

实时荧光定量PCR：定量检测目标基因拷贝数。

显色培养基培养法：使用CT-SMAC培养基区分山梨醇非发酵菌落。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：检测志贺毒素蛋白表达。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）：快速菌种鉴定。

脉冲场凝胶电泳（PFGE）：菌株分子分型与溯源分析。

全自动微生物鉴定系统：VITEK 2 Compact等设备进行生化谱分析。

免疫层析试纸条法：快速现场检测O157抗原。

全基因组测序（WGS）：解析毒力基因谱与耐药基因。

流式细胞术：检测细菌表面特异性抗原。

激光共聚焦显微镜：观察生物被膜三维结构。

微量肉汤稀释法：测定抗生素最小抑菌浓度（MIC）。

蛋白免疫印迹（Western blot）：验证毒力蛋白表达。

代谢组学分析：研究菌株代谢特征差异。

检测仪器

实时荧光定量PCR仪，全自动微生物鉴定系统，脉冲场电泳系统，酶标仪，生物安全柜，恒温培养箱，激光共聚焦显微镜，流式细胞仪，MALDI-TOF质谱仪，冷冻离心机，核酸提取仪，凝胶成像系统，超低温冰箱，厌氧培养箱，全自动菌落计数仪。

检测标准

以上标准仅供参考，如有其他标准需求或者实验方案需求可以咨询工程师

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。