分子伴侣结合蛋白检测

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信息概要

分子伴侣结合蛋白检测是针对细胞内一类特殊蛋白质的检测服务，这些蛋白质通过与靶蛋白结合，协助其正确折叠、组装、转运或降解，维持细胞稳态。检测分子伴侣结合蛋白的重要性在于其与多种疾病（如神经退行性疾病、癌症）密切相关，有助于评估细胞应激反应、药物作用机制和疾病诊断。检测信息涵盖结合活性、表达水平、结构变化等方面。

检测项目

结合亲和力, 结合动力学参数, 蛋白表达量, 热稳定性, 构象变化, 磷酸化状态, 泛素化水平, 亚细胞定位, 相互作用强度, 配体特异性, 变构效应, 二聚体形成能力, 酶活性调控, 热休克反应, 细胞毒性评估, 突变影响分析, 免疫共沉淀验证, 荧光共振能量转移, 表面等离子体共振, 圆二色谱分析

检测范围

热休克蛋白70家族, 热休克蛋白90家族, 伴侣素蛋白, 小热休克蛋白, 免疫亲和蛋白, DNAJ蛋白家族, GRP78蛋白, HSP60蛋白, HSP27蛋白, BIP蛋白, calnexin蛋白, calreticulin蛋白, FKBP蛋白, cyclophilin蛋白, Hsc70蛋白, HSP104蛋白, GrpE蛋白, ClpB蛋白, DnaK蛋白, GroEL蛋白

检测方法

等温滴定量热法：通过测量结合过程中的热量变化来评估结合亲和力和热力学参数。

表面等离子体共振技术：实时监测分子伴侣与靶蛋白的结合和解离动力学。

荧光偏振法：利用荧光标记分析结合事件导致的偏振变化，检测相互作用强度。

免疫共沉淀：通过抗体捕获分子伴侣复合物，验证体内或体外结合情况。

Western blotting：定量检测分子伴侣蛋白的表达水平和修饰状态。

圆二色谱法：分析蛋白质二级结构变化，评估结合引起的构象稳定性。

尺寸排阻色谱：分离和鉴定分子伴侣与靶蛋白形成的复合物大小。

核磁共振波谱：提供原子级分辨的结合界面和动态信息。

X射线晶体学：解析分子伴侣结合蛋白的三维结构。

酶联免疫吸附试验：高通量检测分子伴侣的结合活性和浓度。

荧光共振能量转移：测量分子间距离，验证近距离相互作用。

动态光散射：评估结合后蛋白质复合物的粒径和聚集状态。

质谱分析：鉴定结合位点的翻译后修饰和相互作用网络。

细胞热转移分析：在活细胞中评估蛋白质的热稳定性和结合效应。

微量热泳动技术：通过温度梯度测量结合引起的迁移率变化。

检测仪器

等温滴定量热仪, 表面等离子体共振仪, 荧光偏振分析仪, 免疫共沉淀系统, Western blot成像系统, 圆二色谱仪, 尺寸排阻色谱系统, 核磁共振谱仪, X射线衍射仪, 酶标仪, 荧光显微镜, 动态光散射仪, 质谱仪, 细胞热转移分析设备, 微量热泳动仪

分子伴侣结合蛋白检测如何帮助疾病诊断？该检测可评估分子伴侣在病理状态（如阿尔茨海默病）中的异常表达或功能失调，通过分析结合活性变化辅助生物标志物开发。

为什么需要检测分子伴侣的结合动力学？结合动力学参数（如kon/koff）能揭示相互作用的速度和稳定性，对于药物筛选和机制研究至关重要。

分子伴侣检测中常用的高通量方法有哪些？酶联免疫吸附试验和表面等离子体共振技术可实现快速、自动化筛查，适用于大规模样本分析。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试望见谅。